3.
4 AUTOMATIZACIÓN DEL HEMOGRAMA
Los contadores o autoanalizadores hematológicos permiten analizar un volumen grande de muestra en tiempos
reducidos (hasta 120 por hora) con mayor exactitud, precisión, seguridad y sencillez que los métodos manuales.
Cuantificación mayor número de parámetros:
Gestión de datos:
- Conectividad en red de varios analizadores.
- Acceso remoto en tiempo real. (Puede acceder el médico)
Componentes de un contador hematológico:
- Circuito hidráulico (Mueve los reactivos y muestras)
Consta de los depósitos de reactivos, los distribuidores, las cámaras de mezclado y las cámaras de medidas.
- Sistema neumático.
Suministra la presión necesaria para que los fluidos circulen por el sistema hidráulico.
- Componente eléctrico y electrónico.
Este componente es fundamental para realizar las mediciones y entre otros, lo constituye los electrodos, los sensores, la
fuente de luz y los convertidores analógicos a digital.
- Software específico.
Tiene dos funciones:
- Analizar toda la información del componente eléctrico y lo transforma en resultados.
- Están conectados a sistemas informáticos del laboratorio.
Principios físicos en los que se basa los contadores:
1. MEDICIÓN DE LA VARIACIÓN DE LA IMPEDANCIA
Fórmula patentada por un físico llamado Coulter.
La impedancia es la oposición que genera un circuito eléctrico al paso de la corriente.
En la cámara de medida, hay dos electrodos en dos cámaras separadas por una pantalla que tiene un orificio. Por dicho
orificio, va pasando la disolución electrolítica.
Cuando una célula sanguínea atraviesa el orificio lo obstruye y no permite la circulación de iones. Con lo cual hay
oposición al paso de la corriente eléctrica, por tanto, hay aumento de la impedancia.
El número de pulsos que se registran es directamente proporcional al número de células que pasan.
Ahora bien, este orificio es de diferentes medidas dependiendo del tipo de célula que se va a estudiar.
Si queremos realizar el estudio de hematíes y plaquetas: orificio pequeño.
Si queremos estudiar los leucocitos: orificio grande.
2. ANÁLISIS DE LA DISPERSIÓN ÓPTICA
El dispositivo de medida es un capilar (forma de embudo) por el que circula la suspensión de células sanguíneas, van en
dirección al cuello del embudo.
En el cuello del embudo se incide un haz de luz.
El capilar tiene esta forma de embudo porque el haz de luz debe de atravesar una a una las células sanguíneas y a esto se
le llama centrado hemodinámico. (para que el haz de luz pase por una célula no por tres a la vez).
o Principio de dispersión de la luz con campo oscuro.
Puede ocurrir 2 supuestos:
- La luz halógena no incida sobre ninguna célula sanguínea del cuello del capilar entonces no se produce
dispersión de la luz. El haz de luz es absorbido por el disco de campo oscuro porque no hay dispersión. En el
fotodetector no se detecta nada.
- El haz de luz halógena incide sobre una célula sanguínea y se produce la dispersión de la luz halógena.
Esquivando el disco de campo oscuro con lo cual, los rayos dispersos se detectan en el fotodetector.
- El número de señales detectadas en el fotodetector es proporcional al número de células. (Un eritrocito
dispersa un rayo de luz y un leucocito dispersa 4 rayos de luz)
o Método del rayo láser.
La fuente lumínica es un rayo láser que se hace incidir sobre el cuello del embudo.
Los diferentes ángulos de dispersión serán diferentes dependiendo de la célula con la que incidan.
Si es una plaqueta ángulo pequeño, leucocito ángulo grande.
Si hay ángulo de dispersión bajo nos da una idea del volumen celular.
Si hay ángulo de dispersión alto nos da datos sobre la complejidad celular. (Nos permite diferenciar entre una célula
con más o menos núcleos, si tiene gránulos o no, diferentes tipos de leucocitos)
3.4.3 MEDIDAS DE LA SERIE ROJA Y PLAQUETAS
CANAL ERITROCITOS/PLAQUETAS
Método de variación de impedancia.
Se usa en la cubeta:
- 0,5 ml de sangre diluida:
o 50.000 células por muestra.
- El recuento es muy exacto. Debido a que la cubeta tiene muchos orificios (nos permite realizar muchas medidas
a la vez) o porque tiene un sólo orificio y se realiza el recuento varias veces con la misma muestra para
comprobar. (+exacto)
- Parámetros del hemograma:
o Línea roja: Volumen corpuscular medio, Amplitud de distribución eritrocitaria.
o Línea plaquetaria: Volumen plaquetario medio, IDP.
CANAL DE HEMOGLOBINA
En este canal se mide la concentración de hemoglobina por colorimetría por el método de la cianmetahemoglobina.
Gracias a los datos proporcionados por el canal y a los datos que nos ofrece el canal eritrocitos/plaquetas vamos a poder
detectar los siguientes parámetros:
Gracias a la combinación de los 2 canales, uno sólo no sirve.
- La concentración de hemoglobina.
- Hemoglobina corpuscular media.
Combina la impedancia con dispersión óptica en ángulo alto.
3.4.4 MEDIDAS DE LA SERIE BLANCA
CANAL PEROXIDASA
La peroxidasa es la tinción más utilizada en este contador.
Gracias a la tinción en este canal podemos diferenciar 5 poblaciones de leucocitos.
▫ Los eosinófilos y los neutrófilos son los que tienen más peroxidasa, por cual se teñirán más.
▫ Los monocitos contienen peroxidasa, pero poca cantidad, por lo cual se teñirán, pero menos.
▫ Los linfocitos y LUC (leucocitos gran tamaño, no patológicos, pero en ciertas enf. sí) no tiene peroxidasa --> no
se tiñen.
Parámetros que se evalúan:
- IAPM (Índice de actividad peroxidasa media de neutrófilos).
CANAL BASÓFILOS
Los basófilos se superponen con los monocitos por ello tienen su propio canal.
Tiene un sistema de lisis especial: Destruye todas las células menos los basófilos.
Parámetros que se evalúan en el hemograma:
- Recuento de basófilos.
AUTOMATIZACION DEL HEMOGRAMA
EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS
Pueden ser resultados gráficos, que a su vez pueden ser histogramas, citogramas y gráficos de flujo.
También vamos a tener resultados numéricos.
El conjunto de todo genera dos tipos de informes, uno para el técnico (Incluye todos los datos habría que validarlo) y para
el clínico (Sólo numérico) Analítica de casa.
CAUSAS DE ERRORES
Son las limitaciones del equipo (Meter muestras contaminadas o la formación de burbujas) y por la naturaleza de la
muestra (Coagulación parcial o lisis deficiente de hematíes)
CALIBRACIÓN Y MANTENIMIENTO
Hay que calibrarlo con un blanco o con un patrón de referencia y mantenimiento diario o periódico.
Se realiza para garantizar la exactitud del equipo.
MORFOLOGÍA CELULAR DIGITAL
A pesar de la gran fiabilidad de los equipos, el 20% de las muestras requieren comprobación realizada por los técnicos.
Hay que realizar una observación microscópica de frotis, se puede realizar manualmente realizada por el técnico con una
tinción de May- Grünwald Giemsa y lo observo al M.O.
- A través de un equipo extensora / teñidora automática además tiene un sistema de microscopia al 10 o 40X,
acompañado de un software de análisis de imagen.
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN GLOBULAR
La velocidad de sedimentación GLOBULAR (VSB), o velocidad de sedimentación eritrocitaria o eritrosedimentación,
mide la precipitación o sedimentación de los hematíes en un tiempo determinado.
Hace referencia a la línea roja.
VSG a una hora:
o Tendencia de los eritrocitos a formar acúmulos.
o Relacionado con la concentración plasmática de algunas proteínas (albúminas)
Marcador muy inespecífico.
Valores elevados en procesos:
▫ Inflamatorios.
▫ Infecciosos.
▫ Neoplásicos.
Este valor se puede obtener de forma:
- Manual: Método de Westergren.
1. Coger una pipeta de Westergren calibrado de 0 - 100.
2. Echar sangre diluida a proporción 4:1. (4 parte sangre y 1 parte de anticoagulante citrato de Na al 3,8
Esperar 1 hora.
Por la fuerza de la gravedad todos los GR sedimentan en el tubo.
Nos permite medir la VSG. X= 14mm
Los valores normales varían entre el hombre y la mujer.
Hombre: Menor a 15mm Mujer: Menor a 20 mm
- Métodos automáticos:
Hay que usar tubos especiales con cantidad adecuada de anticoagulante.
1. Sistema óptico de medida: - Fuente de luz - Detector detrás del tubo.
2. Medida:
- Barrido del tubo. - Detección densitométrica del punto de separación (interfase) entre plasma y hematíes y lo traduce
en un número. VSG en mm.
