UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA
ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA
PATOLOGICA
ASIGNATURA: HEMATOLOGÍA CLÍNICA II
SESION DE CLASE: 15
TEMA: HEMOGRAMA AUTOMATIZADO
DOCENTE: ROSANA G. MORALES FLORES FECHA:11 -12-2023
VISION Y MISION DE LA ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA
MEDICA, APORBADA POR RESOLUCIÓN DE CONSEJO DE
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
N.º 0706-2023-CF.F.CC.SS.-UPLA
VISION MISION
• “Ser una Escuela Profesional • “Formar íntegramente a los
líder y competitiva a nivel tecnólogos médicos dedicados
regional en la formación de al diagnóstico, prevención,
profesionales en Tecnología tratamiento y rehabilitación de
Médica comprometidos en la salud, a través de la
investigación con investigación e innovación,
responsabilidad social en haciendo uso de la tecnología
beneficio de la sociedad”. con responsabilidad social en
beneficio de la sociedad”
AUTOMATIZACIÓN
• La automatización se traduce en resultados más rápidos, con datos
altamente reproducibles, con menor error que en las
determinaciones manuales; prácticos sistemas de control de calidad y
óptima contribución a la bioseguridad.
• Dejando así el control y confirmación de las dudas y alarmas que
indica el instrumento a un ojo experto que ayude a confirmar dichos
avisos, además el control y conocimiento del instrumental debe ser
riguroso, por ese motivo es obligatorio el conocimiento a través del
manual, practicas y experiencias propias para lograr tener la
responsabilidad de su manejo rutinario.
Hemograma automatizado
• Brinda información cuantitativa y
morfológica de las células y
partículas existentes en la sangre:
Eritrocitos
Leucocitos
Plaquetas
Concentración de hemoglobina
Información porcentual y
absoluta de las sub-poblaciones
de leucocitos
Tecnología: Principios de medición
• La tecnología empleada por los analizadores
varía dependiendo del fabricante y de las
patentes empleadas en cada modelo.
• Ej. Counter 29 utiliza los siguientes
principios de medición:
1. Impedancia eléctrica para el recuento de
eritrocitos (RBC) y plaquetas (PLT).
2. Método colorimétrico para la
determinación de hemoglobina (HGB).
3. Citometría de flujo, dispersión por láser en
tres ángulos y tinción química para el
recuento de leucocitos (WBC) y el
diferencial de 5 partes.
Descripción general de los sistemas
automatizados
• Hay cuatro fases para el análisis de una muestra de sangre en los diversos
contadores multiparamétricos:
• 1ra. Fase: Aspiración y división de la muestra
• 2da. Fase: procesamiento de la muestra
• 3ra. Fase: determinación analítica de la célula o del parámetro de interés
• 4ta. Fase: procesamiento de las señales de emisión del resultado.
1ra. Fase: Aspiración y división de la muestra
• La muestra de sangre es aspirada y
dividida en dos o mas capas paralelas
de procesamiento.
• Dependiendo del modelo del
contador, la sangre es homogenizada
y aspirada en el sistema de tubo
cerrado o abierto.
• Este proceso generalmente se hace
mediante una válvula de separación
llamada “shear valve”
• Compresor: aporta la presión y el
vacio.
2da. Fase: procesamiento de la muestra
• En cada canal respectivo de procesamiento, la muestra se diluye y se
trata a modo de facilitar y permitir el recuento o la medición del
parámetro de interés
• En esta fase se colorean las células o hay lisis de un determinado tipo
celular para distinguir la célula de interés
• Liquido diluyente: solución isotónica con capacidad conductora.
3ra. Fase: determinación analítica de la
célula o del parámetro de interés
• Comprende el recuento y/o medición del • Reactivos usados:
tamaño y/o contenido del a célula de interés
se evalúa por:
La determinación de sus características de
frecuencia de pulsos eléctricos (impedancia)
Características de dispersión de luz
Características de absorción de luz
Características citoquímicas
Incorporación de fluorocromos
Marcación de anticuerpos monoclonales
Dosificación de otro parámetro específico (ej.
Hb)
Todo ello de modo aislado o simultaneo
Impedancia eléctrica
• Utiliza la propiedad de las células
(leucocitos, hematíes y plaquetas) de ser • De esta forma se obtiene:
malas conductoras de la electricidad.
Recuento de glóbulos rojos
• Uno de los reactivos usados en el Recuento de plaquetas
contador es una solución isotónica, sin
Recuento de glóbulos blancos, y su
partículas y conductora de la electricidad. diferenciación en sub-poblaciones
• La sangre diluida en ese reactivo, hace según el tamaño del elemento
(fórmula leucocitaria)
que se produzca un aumento de la
resistencia eléctrica; ante el paso de un Se visualizan gráficos de distribución
de frecuencias (histogramas).
elemento, que corta la corriente eléctrica,
El analizador presenta el histograma
generándose un pulso eléctrico medido RBC/PLT, cuyo eje X representa el
por el software del equipo. volumen celular (fl) y el eje Y
representa la cantidad de células.
• Todo equipo automatizado, suministra
dos tipos de resultados: un informe
numérico y un informe gráfico
• HISTOGRAMA: son gráficos de un solo
parámetro que proporcionan
información sobre el número de células
y la intensidad del parámetro medido
(eje X)
• CITOGRaMA O DISPERSOGRAMA:
relacionan 2 o 3 parámetros, intensidad
del parámetro 1 (eje Y) Vs intensidad
del parámetro 2 (eje X)
Método colorimétrico
• La dilución de WBC/HGB se administra al baño de HGB donde se mezcla con
burbujas y con una determinada cantidad de lisante, que convierte la
hemoglobina en un complejo de hemoglobina que se mide en 530 nm.
• En un lado del baño se coloca un LED que emite un rayo de luz monocromática,
cuya longitud de onda central es de 530 nm.
• La luz que pasa a través de la muestra es detectada por un sensor óptico colocado
en el lado opuesto.
• A continuación, esta señal es amplificada, luego medida y comparada con la
lectura de referencia del blanco (lecturas realizadas cuando sólo hay diluyente en
el baño).
• La concentración de hemoglobina es calculada por el analizador de forma
automática.
Contadores hematológicos modernos pueden
combinas en un mismo analizador métodos de
detección y caracterización celular
Impedancia eléctrica
Radiofrecuencia o conductividad eléctrica
Citometría de flujo: dispersión óptica, fluorescencia
Absorción de la luz (Hemoglobina)
Citoquímica (peroxidasa)
Lisis selectiva (basófilos)
4ta. Fase: procesamiento de las señales
de emisión del resultado.
• Las señales eléctricas u ópticas se
computan en un software del equipo
y estas se transforman en resultados
estandarizados como: Células/mm³, ul
y porcentaje de células, g/dl, índices
hematimetricos, gráficos y alarmas
(flags) para alteraciones específicas.
• Transductor: recibe saeñales
eléctricas y ópticas y la convierte en
señales numéricas y graficos
• Procesador: procesa toda la
información recibida por el analizador
• Registrador
Dosaje de Hb
• Se suele usar el sobrenadante de la dilución con que se realizó el conteo de leucocitos.
• Casi todos los equipos utilizan un método fotométrico
• Metodo de cianmetahemoglobina modificado o método libre de cianuro en la celda de flujo de la
Hb, un LED emite haz de 540 – 555 nm que impacta con la muestra en la celda de flujo.}
• La concetracion de la Hb se mide por absorbancia.
• Esta absorbancia se compara con la del diluyente sólo (blanco) que midió antes de la adición de la
muestra .
Ancho de distribución de las plaquetas
(PDW)
Utilidad clínica:
Importante en el estudio de los sindromes
mieloproliferativos y en la anemia perniciosa,
donde característicamente esta por encima
del límite superior.
Plaquetocrito
Representa el porcentaje del volumen de
plaquetas sobre el volumen total de la sangre.
De poca utilidad.
Nuevos parámetros
Citograma DIFF de leucocitos de un
paciente con recuento diferencial normal.
A. Leucopenia; se observa una marcada disminución de linfocitos, neutrófilos y eosinófilos, así como
ausencia de monocitos.
B. Linfocitos reactivos, acompañados por un aumento de monocitos
C. Granulocitos inmaduros.
D. Eritroblastos.
E. Leucemia mieloide crónica, confirmada por estudio medular y citogenético; en la región en la que
normalmente se ubican los neutrófilos y los granulocitos inmaduros se ve una única población, de color
gris, que el autoanalizador no identificó; también se observa leucocitosis.
