MOP:PRELEVEMENT PUS
SOMMAIRE
1. BUT ET ETENDUE
2. BIBLIOGRAPHIE
3. DEFINITIONS-ABREVIATIONS
4. CONTENU
4.1. PHASE PRE-ANALYTIQUE
4.1.1. Prélèvement et nature de l’échantillon
4.1.2. Traitement de l’échantillon
4.1.2.1. Préparation et traitement de l’échantillon :
4.1.2.2. Conservation :
4.2. PHASE ANALYTIQUE
4.2.1. Principe du dosage
4.2.2. Appareillage et consommables utilisés
4.2.3. Protocole opératoire
4.3. PHASE POST-ANALYTIQUE
4.3.1. Rendu des résultats dans le système informatique
4.3.2. VARIATIONS PHYSIOPATHOLOGIQUES – INTERET CLINIQUE
4.3.3. Devenir de l’échantillon
4.3.4. Elimination des produits utilisés
4.3.5. HYGIENE ET SECURITE – CONDITIONS PARTICULIERES
4.3.6. ARCHIVAGE
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1. BUT ET ETENDUE
Ce mode opératoire a pour but de décrire la technique de mise en évidence, quantification et
identification de germes pathogènes dans les prélèvements de pus (bactéries, levures, mycoses).
Il concerne les techniciens de bactériologie.
MOP:PRELEVEMENT PUS
2. BIBLIOGRAPHIE
NF EN ISO 9001 version en vigueur
NF EN ISO 15189 version en vigueur Procédures exigées
GBEA
REMIC- Version en vigueur
3. DEFINITIONS-ABREVIATIONS
NA
4. CONTENU
4.1. PHASE PRE-ANALYTIQUE
4.1.1. Prélèvement et nature de l’échantillon
Le prélèvement doit être effectué si possible avant la mise en route d’un éventuel traitement
antibiotique ou antiseptique.
Préparation du patient : aucune particularité
Nature du prélèvement : pus
Contenant : écouvillons stériles, eswab
Anticoagulant, additifs : aucun
Noter le site de prélèvement.
4.1.2. Traitement de l’échantillon
4.1.2.1. Préparation et traitement de l’échantillon :
L’échantillon doit être identifié au nom du patient et n° de dossier dès le prélèvement.
4.1.2.2. Conservation :
L’échantillon, conservé à température ambiante, doit être techniqué au maximum 3 heures
après le prélèvement pour les prélèvements sur écouvillon.
Pour un prélèvement effectué sur ESWAB l’échantillon peut être techniqué dans les 48h.
4.2. PHASE ANALYTIQUE
4.2.1. Principe du dosage
Mise en évidence, quantification et identification de germes pathogènes dans les
prélèvements de pus (bactéries, levures, mycoses).
4.2.2. Appareillage et consommables utilisés
Nom : microscope Fournisseur : Zeiss
Lames et öses stériles
MOP:PRELEVEMENT PUS
Géloses
Andromas pour les identifications des bactéries et des levures.
WalkAway pour les antibiogrammes.
4.2.3. Protocole opératoire
Le technicien ou biologiste s’identifie, indique sa démarche et résultats trouvés sur le
dossier électronique du patient à chaque étape de l’analyse :
- J0, Ensemencement
- J1, Résultat culture
- J2, Résultat identification (+ Résultat culture négatif le J2)
- Validation du biologiste
Jour 0
Faire 1 lame pour coloration de Gram
Examen direct Faire 1 lame pour le MGG
Ensemencer systématiquement
Deux géloses au sang pendant 48h :1 en anaérobiose et 1 sous CO2
Une gélose PVX sous CO2 pendant 48h
Un Cled air ambiant 37°C pendant 24h
Un bouillon Schaedler événtuel sous air ambiant pendant 24h à 37°C
Mise en culture
Un Sab en tube air ambiant 37°C pendant 24h puis 24h à T° ambiante
Un Sab +actidione en tube air ambiant 37°C pendant 24h puis 24h à T°
ambiante
Jour 1
LECTURE DU GRAM ET DU MGG : APPRÉCIER LA QUANTITÉ DE LEUCOS, DE CELLULES , LE TYPE ET
LA QUANTITÉ DE BACTÉRIES , LA PRÉSENCE ÉVENTUELLE DE LEVURE……
Absence de germes après Présence de germes après 24h
24h
1 à 2 bactéries de pathogénicité
Lecture et reconnue en flore pure ou
Tout autre cas
interprétatio prédominante (sauf d’origine
n Ranger à l’étuve pour lire à 48 heures cutanée).
Mélange de germes sans
Indentification de(s) germe(s) +
prédominance
ATB
Jour 2
Absence de germes après Présence de germes après 48 h
48h
1 à 2 bactéries de pathogénicité
Lecture et reconnue en flore pure ou
Tout autre cas
interprétatio prédominante (sauf d’origine
n Terminé cutanée)
Indentification de(s) germe(s) + Mélange de germes sans
ATB prédominance
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4.3. PHASE POST-ANALYTIQUE
4.3.1. Rendu des résultats dans le système informatique
Cf. « Guide simplifié d’utilisation d’HISTONE » INS-Tous-RS/MT-002
« Validation biologique » PRG-Tous-R/3PO-002
4.3.2. VARIATIONS PHYSIOPATHOLOGIQUES – INTERET CLINIQUE
Recherche d’un germe infectieux responsable des signes cliniques.
4.3.3. Devenir de l’échantillon
Lieu de conservation de l’échantillon : Chambre froide A0-CHF-0001.
Durée : une semaine.
4.3.4. Elimination des produits utilisés
Cf « Logistique d’élimination des déchets contaminés au laboratoire ». INS-Tous-
RS/HS-004
4.3.5. HYGIENE ET SECURITE – CONDITIONS PARTICULIERES
Cf. « Hygiène et sécurité » PGR-Tous-RS/HS-001
4.3.6. ARCHIVAGE
Cf. « Traçabilité - Maitrise des enregistrements – Archivage » PRG-Tous-DQ/MQ-005.
