LABO #5 : DIGESTION ENZYMATIQUE DE MACROMOLÉCULES
M. Provost et A.- A. Payette
Chez les êtres vivants, la digestion permet de transformer les aliments en nutriments
assimilables. C’est ainsi que des macromolécules complexes, grâce à des réactions
enzymatiques (chimiques), sont réduites en leurs simples unités constituantes.
(1
)
Chaîne polypeptidique Acides aminés (2
(Protéine) )
Triglycéride (3
)
Produits de la digestion des macromolécules.
Tirées de (1) http://bv.alloprof.qc.ca/s1262.aspx; (2)
http://www.vegetarisme-et-sante.fr/wp-content/uploads/proteinmolecule.gif; (3)
http://bv.alloprof.qc.ca/s1262.aspx
Le but de cette séance de laboratoire est de procéder à des essais de digestion de
substrats de trois natures : un glucidique, un protéiné et un lipidique. Pour ce faire, un
suc digestif inconnu est fourni à chaque équipe d’étudiants qui devra ensuite, à partir
des résultats obtenus à chaque étape de l’expérimentation, l’identifier.
Avant de procéder à l’expérimentation, chaque équipe devra émettre des hypothèses
(une par étape) quant aux résultats de la digestion attendus si le suc digestif inconnu est
assorti au bon substrat.
OBJECTIFS D’APPRENTISSAGE :
Se familiariser avec les différentes réactions enzymatiques de la digestion;
Identifier un suc digestif inconnu à partir des résultats obtenus à la suite de la
digestion des substrats fournis;
Se questionner sur le rôle de la température pour assurer une digestion
efficace;
Consolider les notions théoriques sur la digestion en répondant à des
questions de réflexion en lien avec l’expérimentation.
MATÉRIEL
Par équipe de deux étudiants :
15 ml d’un des trois sucs digestifs inconnus (salive, suc gastrique ou suc
pancréatique); GARDER SUR LA GLACE AVANT LES MANIPULATIONS
- Amylase salivaire (1 g/150 ml)
- Pepsine (3 g/100 ml)
- Pancréatine (3 g/150 ml)
Solution de lugol
Rouge de phénol (1/table)
Eau distillée
6 pipettes sérologiques de 5 ml identifiées avec un marqueur
Crayon marqueur permanent
9 tubes (éprouvettes)
Support pour transporter les tubes
Bac à glace avec glace (1/table)
Aide-pipette (grosse poire grise)
Chronomètre (votre montre ou téléphone)
Pour tous, à l’avant de la classe :
Solution d’amidon (0,2 g/150 ml H20)
Gélatine fondue (sachet de gélatine commerciale)
Crème à 35%
5 ml de solution de Fehling A (69 g CuSO4 * 5 H20/L)
CORROSIF
5 ml de solution de Fehling B (346 g tartrate de Na+ et K+/L + 100 g NaOH/L)
S
Bouteille de NaOH 1M
2 pipettes sérologiques de 5 ml
Gants
1 bain-marie à 37C
1 vortex
MANIPULATIONS
Il est important de suivre attentivement les étapes de chaque partie de
l’expérimentation pour arriver à identifier, sans doute possible, le suc digestif inconnu.
De plus, avant de débuter l’expérimentation, prendre huit tubes et les identifier comme
suit : A1, A2, A3, A4, G1, G2, C1 et C2.
PARTIE 1 : EFFET DU SUC DIGESTIF INCONNU SUR LA GÉLATINE
1. Mettre environ 1,5 ml de gélatine dans les tubes G1 et G2;
2. Ajouter 3 ml d’H20 distillée au tube G1 et agiter;
3. Ajouter 3 ml du suc digestif inconnu au tube G2 et agiter;
4. Incuber les tubes G1 et G2 à 37C durant 30 minutes;
5. Mettre les tubes sur la glace pour 35-45 minutes;
6. Observer l’état de la gélatine et noter les résultats dans le tableau qui suit.
Tube Aspect du contenu
G1
G2
Qu’en est-il de la consistance?
M.
Provost
PARTIE 2 : EFFET DU SUC DIGESTIF INCONNU SUR L’AMIDON
1. Agiter la solution d’amidon et en mettre 3 ml dans les tubes A1, A2, A3 et A4;
2. Ajouter 3 ml d’eau distillée dans les tubes A1 et A3 et agiter;
3. Ajouter 3 ml du suc digestif inconnu dans les tubes A2 et A4 et agiter;
4. Incuber les quatre tubes dans un bain-marie à 37C durant 30 minutes.
Test de lugol
Le réactif de lugol est une solution iodée, de couleur brune, qui permet de
mettre en évidence la présence d’amidon. Lorsque qu’il se lie à l’amidon, une
coloration bleu violacé apparait, sinon la coloration reste brune. Il est donc
possible de déduire facilement si l’amidon est présent ou non dans une
solution.
1. Prendre les tubes A1 et A2;
2. Ajouter 5 gouttes ou plus de lugol dans chacun;
3. Agiter les tubes et attendre 5 minutes;
4. Observer la coloration et noter le résultat dans le tableau qui suit.
http://www.didier-
pol.net/glycol.jpg
Test de la liqueur de Fehling (attention! corrosive)
La liqueur de Fehling contient des ions cuivre (Cu 2+), de couleur bleue en milieu
basique, qui permettent de mettre en évidence la présence de sucres réducteurs.
Lorsque certains de ces sucres sont présents dans une solution, un précipité rouge
brique se forme.
1. Bien mélanger 3 ml de solution de Fehling A avec 3 ml de
solution de Fehling B;
2. Ajouter 3 ml de ce mélange dans les tubes A3 et A4 et
agiter;
3. Incuber à 37C durant 15 minutes, puis laisser à la
température de la pièce pour 30 autres minutes;
4. Observer la coloration et noter le résultat dans le tableau
qui suit.
http://biology-igcse.weebly.com/uploads/
1/5/0/7/15070316
/743953.jpg?437
Test du lugol Test de Fehling
Tube Tube
Aspect du contenu Aspect du contenu
A1 A3
A2 A4
PARTIE 3 : EFFET DU SUC DIGESTIF INCONNU SUR LA CRÈME
Le rouge de phénol et le NaOH
Le rouge de phénol est une solution indicatrice de la condition acidobasique d’un
milieu. Quand il est ajouté à un milieu alcalin, il le colore de rouge. Son ajout dans un
milieu acide résultera en une coloration jaune plus ou moins intense selon le degré
d’acidité. De son côté, l’hydroxyde de sodium (NaOH) est parfois ajouté à un milieu
pour le rendre plus alcalin. Ceci afin de pouvoir mieux constater, le cas échéant, un
changement de pH résultant d’une réaction chimique.
1. Mettre 3 ml de crème dans les tubes C1 et C2;
2. Ajouter 3 gouttes de rouge de phénol dans chaque tube
(C1 et C2);
3. Si la solution est jaune, ajouter lentement 2 gouttes de
NaOH qui est devant (le tout deviendra rosé);
4. Ajouter 3 ml d’H20 distillée au tube C1 et agiter;
5. Ajouter 3 ml du suc digestif inconnu au tube C2 et agiter;
6. Incuber à 37C durant 15 minutes;
7. Observer la coloration du mélange et noter les
M. Provost
résultats dans le tableau qui suit.
Tube Aspect du contenu
C1
C2
QUESTIONS DE RÉFLEXION
Répondre aux questions suivantes en vous basant sur les résultats obtenus dans ce
laboratoire, les notions vues en classe et la lecture de votre livre de référence. Vous
devez faire des liens entre les conditions reproduites dans cette séance de laboratoire et
celles nécessaires, in vivo, pour assurer une digestion adéquate des macromolécules
étudiées.
Partie A
1. Nommer l’enzyme présente dans la salive qui permet de débuter la digestion?
a. Quel type de macromolécule cette enzyme permet de digérer?
b. Le test du lugol vise à démontrer quoi?
c. Quels sont les sous-produits de la digestion qui sont détectés par le test
de Fehling?
d. Chez un être vivant, quel est le pH adéquat pour l’activité de cette
enzyme?
Partie B 2. Quel est principal élément constituant de la gélatine?
3. Nommer l’enzyme présente dans le suc gastrique qui permet de débuter la
digestion de la gélatine?
a. Quel type de macromolécule cette enzyme permet de digérer?
b. Chez un être vivant, quel est le pH adéquat pour l’activité de cette
enzyme?
c. Pourquoi la texture de la gélatine change-t-elle? Expliquer clairement.
Partie C 4. Quel est principal constituant de la crème?
5. Nommer l’enzyme présente dans le suc pancréatique qui permet la digestion
de la crème?
a. Quel type de macromolécule cette enzyme permet de digérer?
b. Chez un être vivant, quel est le pH adéquat pour l’activité de cette
enzyme?
c. Que pourrait-on ajouter à cette expérimentation pour augmenter
l’efficacité de cette enzyme?
Tout 6. Pourquoi, à chaque partie de l’expérimentation, les tubes sont-ils chauffés
dans un bain-marie?
ÉVALUATION DE CE LABORATOIRE PAR UN MINI-TEST
Assurez-vous de bien répondre aux questions. Il n’y aura pas de corrigé. Vous avez tout
à votre disposition pour bien répondre.
