HDL PREC

EXPECTED VALUES ASSAY PARAMETERS FOR PHOTOMETERS

Cat. No. Pack Name Packaging (Content)
Adults male: 35.3 - 79.5 mg/dl
Adults female: 42.0 - 88.0 mg/dl Mode End Point
BLT00032 HDL PREC 100 R1: 2 x 50 ml, R2 standard: 1 x 5 ml
It is recommended that each laboratory verify this range or derives reference
interval for the population it serves. Wavelength 1 (nm) 505
EN IVD

INTENDED USE Wavelength 2 (nm) 670

WARNING AND PRECAUTIONS
Diagnostic reagent for quantitative in vitro determination of HDL Cholesterol in
For in vitro diagnostic use. To be handled by entitled and professionally educated
human serum and plasma. Sample Volume (μl) 25/50
person.
CLINICAL SIGNIFICANCE Reagents of the kit are not classified as dangerous. R2 contains less than
Working Reagent Volume (μl) 500/1000
High-density lipoproteins (HDL) compose one of the major classes of plasma 0.1% sodium azide - classified as very toxic and dangerous substance for the
lipoproteins. They are synthesized in liver as complexes of apolipoprotein and environment.
Incubation time (min.) 5
phospholipid and are capable of picking up cholesterol and carrying it from arte-
ries to the liver, where the cholesterol is converted to bile acids and excreted into WASTE MANAGEMENT Incubation temp. (°C) 37
the intestine. Please refer to local legal requirements.
An inverse relationship between HDL Cholesterol (HDL-C) levels in serum and the
Normal Low (mg/dl) 42
incidence/prevalence of coronary heart disease (CHD) has been demonstrated in
a number of epidemiological studies. The importance of HDL-C as a risk factor for ASSAY PROCEDURE
Normal High (mg/dl) 79,5
CHD is now recognized. 1. PRECIPITATION
Accurate measurement of HDL-C is of vital importance when assessing patient’s Precipitation of LDL, VLDL and Chylomicrons. Linearity Low (mg/dl) 0
risk for CHD.
PRINCIPLE Pipette Volumes Linearity High (mg/dl) 125
Chylomicrons, LDL and VLDL (low and very low density lipoproteins) are precipi-
tated from serum by phosphotungstate in the presence of divalent cations such Sample or Calibrator 250 μl Concentration of Standard See bottle label
as magnesium. The HDL cholesterol remains unaffected in the supernatent and
is estimated using ERBA Cholesterol reagent. Precipitating Reagent 500 μl Blank with Reagent
Phosphotungstate
Mix well and allow the reaction mixture to stand for 10 minutes at room tempera-
Serum/plasma HDL + (LDL + VLDL + Chylomicrons) Absorbance limit (max.) 0.2
Mg2+ (Supernatent) (Precipitate) ture, Centrifuge at 4000 r.p.m. (1800 x g) for 10 minutes to obtain a clear super-
natent. Use the supernatent to determine the concentration of HDL cholesterol in
Units mg/dl
REAGENT COMPOSITION the sample.
R1 2. CHOLESTEROL DETERMINATION
Phosphotungstic Acid
0.77 mmol/l
Wavelength: 500 (546) nm
Magnesium Chloride 17.46 mmol/l
Cuvette: 1 cm
R2 standard See bottle label
REAGENT PREPARATION Pipette into tubes marked Blank Calibrator Test
Reagent is liquid, ready to use.
Cholesterol Working Reagent 1000 µl 1000 µl 1000 µl
STABILITY AND STORAGE
The unopened reagents are stable till the expiry date stated on the bottle and
Distilled water 50 µl -- --
kit label when stored at 2–8°C.
SPECIMEN COLLECTION AND HANDLING Calibrator -- 50 µl --
Use serum, plasma (EDTA).
It is recommended to follow NCCLS procedures (or similar standardized conditions). Supernatent -- -- 50 µl
Stability in serum / plasma: 24 hours at 20–25°C
7 days at 4–8°C
12 weeks at -20°C Mix well, incubate for 10 min. at 37°C, or 12 min. at 30°C. Read the absorbance
Discard contaminated specimens. of the Calibrator and each test at 500 (546) nm or 505/670 nm for bichromatic
analysers against reagent blank.
CALIBRATION
Calibration with the standard included in the kit.
CALCULATIONS
QUALITY CONTROL
Abs. of Test
To ensure adequate quality control, it is recommended to use controls with assayed HDL Cholesterol = x Concentration of Calibrator (mg/dl)
values. (mg/dl) Abs. of Cal.
UNIT CONVERSION QUALITY SYSTEM CERTIFIED
mg/dl x 0.026 = mmol/l Applications for automatic analysers are available on request. ISO 9001 ISO 13485

Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 00 Brno, CZ

12000052

e-mail: diagnostics@[Link], [Link]

N/58/15/C/INT Date of revision: 20. 8. 2015
 ЛПВП Холестерин
Контроль качества Параметры для работы на полуавтоматическом анализаторе
Кат. № Название на упаковке Фасовка
Для проведения контроля качества рекомендуются контрольные сыворотки,
с аттестованными значениями, для данного метода. Метод Кон.точка
BLT00032 ЛПВП ОСАЖД. 100 R1: 2 x 50 мл, R2 Стандарт: 1 х 5 мл
Коэффициент пересчета Длина волны 1 (нм) 505
RU IVD
ммоль/л = 0,026 х мг/дл Длина волны 2 (нм) 670
Применение Нормальные величины
Набор реагентов предназначен только для in vitro диагностики ЛПВП – Объем образца (мкл) 25/50
ЛПВП-сыворотка
Холестерина в сыворотке и плазме человека. Мужчины 35,3 – 79,5 мг/дл, 0,91 – 2,05 ммоль/л Объем реагент 1 (мкл) 500/1000
Клиническое значение Женщины 42,0 – 88,0 мг/дл, 1,09 – 2,28 ммоль/л
Липопротеины высокой плотности (ЛПВП) один из основных классов Приведенные диапазоны величин следует рассматривать как Объем реагент 2 (мкл) 0
плазменных липопротеинов. Они синтезируются в печени из аполипротеина ориентировочные. Каждой лаборатории необходимо определять свои
Температура инкубации (°C) 37
А-1 и фосфолипидов. Основная их функция - удаление холестерина из стенок диапазоны.
артерий и возвращение его в печень. Там часть холестерина преобразуется Направление реакции Повышение
в желчные кислоты и выделяется в кишечник, а часть вновь включается в Предупреждения и меры предосторожности
клеточный метаболизм. ЛПВП – холестерин обладает защитным действием, Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально Нижний предел нормы (мг/дл) 42
препятствует формированию бляшек и развитию ИБС, что подтверждено обученным лаборантом. Реагенты входящие в набор не содержат опасные
вещества. Реагент 2 (Стандарт) содержит 0,1% азида натрия, который Верхний предел нормы (мг/дл) 79,5
многочисленными исследованиями.
Точное измерение ЛПВП – холестерина очень важно для оценки риска классифицируется как опасное и токсичное вещество для окружающей среды.
Нижний предел линейности (мг/дл) 0
сердечных приступов. Утилизация использованных материалов
Верхний предел линейности(мг/дл) 125
Принцип метода В соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного
Хиломикроны, липопротеиды очень низкой плотности и липопротеиды вида материала. Концентрация стандарта См. на флаконе
низкой плотности осаждаются при добавлении фосфовольфрамовой
Проведение анализа Бланк По реагенту
кислоты и хлорида магния. После центрифугирования, надосадочная
жидкость содержит фракцию липопротеидов высокой плотности, 1. Осаждение ЛПНП + ЛПОНП + Хиломикронов
Мах лимит абсорбции раб. реагента 0,2
которая анализируется на содержание холестерина с помощью набора
ХОЛЕСТЕРИН. Добавить в центрифужные пробирки:
Единицы мг/дл
фосфовольфрамовая кислота Образец / Калибратор 250 мкл
Сыворотка/Плазма ЛПВП холестерин + Осадок
Mg2+ (ЛПНП + ЛПОНП + Хиломикроны) Осаждающий раствор 500 мкл

остав реагентов
С Хорошо перемешать и оставить при комнатной температуре, через 10
R1 минут отцентрифугировать при 4000 g 10 минут. После центрифугирования
Осадитель отделить прозрачный супернатант от осадка и определить в нем
Фосфовольфрамовая кислота 0,77 ммоль/л концентрацию холестерина, используя набор ХОЛЕСТЕРИН.
Магния хлорид 17,46 ммоль/л 2. Определение холестерина
R2 Длина волны: 500 (546) нм
Стандарт Концентрацию см. на флаконе Оптический путь: 1 см
Приготовление рабочих реагентов Температура: 37 °C
Реагенты R1 и R2 жидкие, готовые к использованию. Измерение: против реагента сравнения (бланк)
Стабильность и хранение реагентов Пипетирование Реагент бланк Образец/калибратор
Реагенты R1 и R2 стабильны до достижения указанного срока годности, если
хранятся при 2–8°C. Реагент для определения
1000 мкл 1000 мкл
холестерина
Образцы
Сыворотка или плазма (гепарин). Дистил. вода 50 мкл -
Исследование проводить в соответствии с протоколом NCCLS (или Калибратор / Супернатант - 50 мкл
аналогов).
Стабильность: Смешать, инкубировать при 37˚C - 10 мин или 12 мин. при 30˚C, измерить
24 часа при 20–25°C поглощение калибратора, образца при указанной длине волны, в
7 дней при 4–8°C бихроматическом режиме.
12 недель при -20°C
Расчет
Допускается одноразовое замораживание. ΔАобр.
Сроки хранения действительны, при отсутствии контаминации образцов. С хол. лпвп = конц. кал. х (мг/дл, ммоль/л)
ΔАкал.
Калибровка QUALITY SYSTEM CERTIFIED
Мы рекомендуем для калибровки использовать стандарт, входящий в состав Протоколы для использования на автоматических анализаторах могут ISO 9001 ISO 13485
набора. быть получены по запросу.
Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 00 Brno, CZ
12000052

e-mail: diagnostics@[Link], [Link]

N/58/15/C/INT Дата проведения последнего контроля: 20. 8. 2015
 HDL PREC
VALORES ESPERADOS PARÁMETROS DE ENSAYO PARA FOTÓMETROS
Catalogo. No. Nombre del paquete Presentación (contenido)
Hombre adultos: 35.3 - 79.5 mg/dl
Mujeres adultos: 42.0 - 88.0 mg/dl Modo Punto final
BLT00032 HDL PREC 100 R1: 2 x 50 ml, R2 estándar: 1 x 5 ml
Se recomienda que cada laboratorio verifique este rango oestablezca un in-
tervalo de referenciapara la población evalua. Longitud de onda (nm) 1 505
ES IVD

USO PREVISTO Longitud de onda (nm) 2 670

Reactivo de diagnóstico para la determinación cuantitativa in vitro de HDL cole- ADVERTENCIA Y PRECAUCIONES
sterol en suero y plasma humanos. Para uso de diagnóstico in vitro. Para ser manejado por persona titulada y edu-
Volumen de muestra (μl) 25/50
cada profesionalmente.
SIGNIFICADO CLÍNICO Los reactivos del kit no están clasificados como peligrosos. R2 contiene menos
Lipoproteínas de alta densidad (HDL) componen una de las principales clases Volumen de Reactivo de trabajo (μl) 500/1000
del 0.1% de azida sódica - clasificado como sustancia muy tóxica y peligrosa para
de lipoproteínas del plasma. Ellos son sintetizados en hígado como complejos de el medio ambiente.
apolipoproteína y fosfolípidos y son capaces de recoger el colesterol y llevarlo al Tiempo de incubación (min.) 5
hígado, donde colesterol de las arterias.
es convertido en ácidos biliares y excretado en el intestino. MANEJO DE RESIDUOS Temperatura de incubación. (° C) 37
Una relación inversa entre los niveles de HDL colesterol (HDL-C) en el suero y la Por favor consulte los requisitos legales locales.
incidencia/prevalencia de la enfermedad cardíaca coronaria (CHD) se ha demo- Normal bajo (mg/dl) 42
strado en varios estudios epidemiológicos. Ahora se reconoce la importancia de PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
C-HDL como un factor de riesgo de cardiopatía coronaria. Normal alto (mg/dl) 79.5
1. LA PRECIPITACIÓN
Medición precisa de C-HDL es de vital importancia cuando se evalúan el riesgo
del paciente de cardiopatía coronaria. Precipitación de LDL, VLDL y quilomicrones. Linealidad baja (mg/dl) 0
PRINCIPIO Pipeta Volúmenes Linealidad alta (mg/dl) 125
Quilomicrones, LDL y VLDL (lipoproteínas de baja y muy baja densidad) se pre-
cipitan del suero por fosfotungstato en presencia de cationes divalentes tales Muestra o calibrador 250 μl Concentración del estándar Consulte la etiqueta de la botella
como magnesio. El colesterol HDL permanece invariable en el sobrenandante y
se mide usando el reactivo de colesterol ERBA. Reactivo precipitante 500 μl Blanco con Reactivo
Fosfotungstato
Suero/plasma HDL + (LDL + VLDL + quilomicrones) Mezcle bien y deje reposar durante 10 minutos a temperatura ambiente, cen-
Límite de absorbancia (máximo) 0.2
Mg2+ (Sobrenadante) (precipitado) trifugue a 4000 rpm (1800 x g) durante 10 minutos para obtener un sobrena-
dante claro en la mezcla de reacción. Utilice el sobrenadante para determinar
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Unidades mg/dl
la concentración de colesterol de HDL en la muestra.
R1
Ácido fosfotúngstico 0.77 mmol/l 2. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL
Magnesio Cloruro 17.46 mmol/l Longitud de onda: 500 (546) nm
R2 estándar Consulte la etiqueta de la botella Cubeta: 1 cm
PREPARACIÓN DEL REACTIVO
Reactivo líquido, listo para usar. Pipetear en tubos marcados Blanco Calibrador Prueba

ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO Reactivo de trabajo Colesterol 1000 µl 1000 µl 1000 µl

Los reactivos sin abrir son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta de la botella y el kit cuando se almacena a 2 – 8° C. Agua destilada 50 µl -- --
MANIPULACIÓN Y RECOGIDA DE MUESTRAS
Uso de suero, plasma (EDTA). Calibrador -- 50 µl --
Se recomienda seguir los procedimientos de NCCLS (o similares condiciones
estandarizadas). Sobrenadante -- -- 50 µl
Estabilidad en suero / plasma: 24 horas a 20–25 ° C
7 días a 4–8°C Mezclar bien, incubar durante 10 minutos a 37° C, o 12 min a 30° C. Leer la
12 semanas a -20 ° C absorbancia del calibrador y cada prueba en 500 (546) nm o 505/670 nm para
Deseche las muestras contaminadas. analizadores bi-cromático contra el blanco del reactivo.
CALIBRACIÓN
Calibración con el estándar incluido en el kit. CÁLCULOS
ABS de prueba
CONTROL DE CALIDAD Colesterol HDL = x concentración del calibrador (mg/dl)
Para asegurar el control de calidad adecuado, se recomienda utilizar los controles (mg/dl) ABS de Cal.
con los valores analizados.
CONVERSIÓN DE UNIDADES Aplicaciones para analizadores automáticos están disponibles bajo petición. QUALITY SYSTEM CERTIFIED
mg/dl x 0.026 = mmol/l ISO 9001 ISO 13485

Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 00 Brno, CZ

12000052

e-mail: diagnostics@[Link], [Link]

N/58/15/C/INT Fecha de revisión: 20. 8. 2015
 REFERENCES / ЛИТЕРАТУРА / REFERENCIAS
1. Burstein M., Scholnic H.R., Morfin R. (1970). J. Lipid Res.
2. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics. Burtis, C.A., Ashwood, E.R., Bruns, D.E.;
5th edition, WB Saunders Comp., 2012.

SYMBOLS USED ON LABELS / СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ НА ЭТИКЕТКАХ / SÍMBOLOS UTILIZA-

DOS EN LAS ETIQUETAS

QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: diagnostics@[Link], [Link]
N/58/15/C/INT Date of revision: 20. 8. 2015