Nota de investigación

edigraphic.com
Utilización de leche descremada ultrapasteurizada
como diluyente de semen refrigerado de burro,
destinado a la inseminación de yeguas
Myriam Boeta*
Luis Zarco Quintero*

Abstract
The objective of this study was to evaluate the use of commercial ultrapasteurized non-fat milk as an
extender for donkey semen to be used for the insemination of mares, and to compare it with Kenney´s
extender, which is widely used for equine semen. A total of 28 mares were used, and divided in two groups.
Mares in the control group (n = 11) were inseminated with semen prepared in Kenney´s extender, while those
in the experimental group (n = 17) were inseminated with semen extended in ultrapasteurized non-fat milk.
Semen from a single Kentucky donkey of proven fertility was used in all inseminations. All mares were
monitored by ultrasonography in order to identify the optimum time for insemination. Pregnancy diagnosis
was carried out 15 days after insemination by the ultrasonographic detection of an embrionic vesicle.
Conception rate was 54.5% for the control group, and 76.5% for the mares inseminated with semen diluted
in ultrapasteurized non-fat milk. Results of this study suggest that ultrapasteurized non-fat milk can be used
to extend equine semen with comparable efficiency to that obtained with chemically defined extenders. The
use of commercial milk offers considerable advantages: it is low priced, widely available, remains sterile until
opened, and is ready to be used without any further preparation.
Key words: SEMEN, ULTRAPASTEURIZED NON-FAT MILK, EXTENDER, KENNEY, DONKEY, ARTIFI-
CIAL INSEMINATION

Resumen
El objetivo del presente estudio fue evaluar la utilización de leche descremada ultrapasteurizada
comercial como diluyente para semen de burro, destinado a la inseminación artificial de yeguas, comparán-
dolo con el diluyente de Kenney, ampliamente utilizado para la dilución de semen equino. Se utilizaron 28
yeguas divididas en dos grupos. Las yeguas del grupo testigo (n = 11) fueron inseminadas con semen diluido
en Kenney; las del grupo experimental (n = 17) fueron inseminadas con semen diluido en leche descremada
ultrapasteurizada. Todas las yeguas estaban clínicamente sanas y fueron evaluadas ultrasonográficamente
para determinar el momento óptimo para la inseminación. Para todas las inseminaciones se utilizó semen de
un solo burro, de raza Kentucky, cuya fertilidad había sido previamente probada. A los 15 días posinseminación
se realizó diagnóstico de gestación para verificar la presencia de la vesícula embrionaria. El índice de
concepción fue de 54.5% para el grupo testigo y de 76.5% para el grupo inseminado con semen diluido en
leche descremada ultrapasteurizada. Los resultados del presente estudio sugieren que la leche descremada
ultrapasteurizada comercial puede ser utilizada para la dilución de semen equino con resultados similares
o mejores a los obtenidos con diluyentes químicamente definidos. La utilización de leche comercial tiene
considerables ventajas, ya que es muy barata en comparación con otros diluyentes, se puede obtener en
cualquier lugar, se mantiene estéril hasta ser abierta, y no requiere de ninguna preparación.
Palabras clave: SEMEN, LECHE DESCREMADA ULTRAPASTEURIZADA, DILUYENTE, KENNEY, BU-
RRO, INSEMINACIÓN ARTIFICIAL.

Recibido el 19 de febrero de 1999 y aceptado el 4 de noviembre de 1999.

* Departamento de Reproducción, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional Autonóma de México, 04510,
México, D.F.

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Introducción Colección, evaluación y dilución de semen
Se han utilizado numerosos diluyentes para la pre- Se utilizó un solo semental para todas las insemina-
servación de semen equino refrigerado. La mayoría se ciones. Este animal fue un burro de raza Kentucky, de
basan en leche o sus subproductos, a los que se le 7 años de edad, en buen estado de salud y con fertilidad
añaden otros ingredientes químicos para ajustar el pH probada. Cuando se requería semen, se colectaba con
y la osmolaridad, así como antibióticos para inhibir el una vagina artificial tipo Hannover y se realizaba la
crecimiento bacteriano.1-3 En la década de los ochenta evaluación seminal. El promedio en el volumen del
comenzó a utilizarse la leche fresca descremada para eyaculado fue de 70 ml. La concentración espermática
la preservación de semen equino refrigerado, en forma del semental fue en promedio de 82 millones de
similar a como se ha usado en el caso de semen espermatozoides/mililitro, con una motilidad progre-
bovino.4 Sin embargo, este tipo de leche tiene que ser siva del 85%. El semen tuvo en promedio 10% de
previamente calentada a una temperatura de 92 a 95° anormalidades totales, siendo todas secundarias.
C durante 10 minutos para inactivar la lactenina pre- Después de colectar el semen se separó el filtro del
sente en la leche, la cual es tóxica para los vaso colector y se procedió a la dilución. Las yeguas del
espermatozoides equinos.5 grupo testigo fueron inseminadas con semen diluido con
En los últimos años el mercado de la leche ha evolu- diluyente de Kenney, que contiene leche descremada en
cionado de tal forma que es muy fácil encontrar leche polvo, glucosa, bicarbonato de sodio y antibióticos, todo
descremada ultrapasteurizada, esta última tiene la ven- disuelto en agua bidestilada.6 El grupo experimental fue
taja de que ha sufrido previamente un proceso de inseminado con semen diluido con leche descremada
ultrapasteurización durante el cual se inactiva la ultrapasteurizada comercial.** En ambos casos el
lactenina, por lo que no es necesario calentarla antes de diluyente se mantuvo en baño María a temperatura cor-
usarla para diluir el semen. Además, este tipo de leche poral (38 ºC) hasta añadir el semen. El grado de dilución
no requiere refrigeración ni la adición de ningún otro varió de acuerdo con la cantidad de yeguas que se te-
nutrimento, por lo que puede ser un diluyente suma- nían para inseminar en esa ocasión, pero regularmente
mente práctico, listo para utilizarse tal como sale del fue de 2:1. Posteriormente el semen se colocó en un ter-
envase. Sin embargo, no existe información publicada mo Equitainer,*** en el cual se enfrió y se mantuvo a una
que demuestre que con este diluyente se obtenga una temperatura de 5 ºC hasta la inseminación de las yeguas.
adecuada fertilidad con semen de equino, y menos aún El semen enfriado se utilizó durante las primeras 48 ho-
con semen de burro. ras posteriores a su colección.

Lugar del estudio Inseminación artificial

Todas las yeguas se inseminaron cuando presenta-
El trabajo se realizó en San Andrés Tuxtla, Veracruz, ban un folículo con características preovulatorias.7 Para
México. Se utilizaron 28 yeguas vacías y clínicamente el caso de que la yegua siguiera en calor al tercer día de
sanas, lo anterior se confirmó mediante palpación rec- inseminada se revisaba, y si no había ovulado, se volvía
tal y evaluaciones ultrasonográficas. A todas las hem- a inseminar. La inseminación artificial se realizó en
bras que presentaban un cuerpo lúteo funcional se les forma transcervical con una pipeta de inseminación con
aplicaron 5 mg de prostaglandina F2 alfa natural. 6* Se funda protectora.8 El volumen de inseminación fue de
detectaron calores y se realizó un seguimiento 10 ml, por lo que la dosis total inseminante fue aproxi-
ultrasonográfico para inseminar a las yeguas en el mo- madamente de 400 millones de espermatozoides. En el
mento más cercano posible a la ovulación.7 día 15 posinseminación se realizó el diagnóstico de
Al momento del estro las yeguas fueron asignadas al gestación por medio de ultrasonografía.
azar a uno de dos grupos. El primero (testigo) estaba
constituido por 11 hembras inseminadas con semen de
burro preparado en un diluyente ampliamente utiliza-
do en equinos (diluyente de Kenney); 8 el segundo Cuadro 1
(experimental) fue formado con 17 yeguas inseminadas PORCENTAJE DE CONCEPCIÓN A PRIMER SERVICIO AL
con semen de burro diluido con leche descremada INSEMINAR YEGUAS CON SEMEN DE BURRO, REFRIGERADO
ultrapasteurizada comercial. EN DOS DIFERENTES DILUYENTES
edigraphic.com Kenney (n = 11) Leche comercial (n = 17)

* Lutalyse, UpJohn, México. Gestantes 6 (54.5%) 13 (76.5%)

** Leche San Marcos Light, Aguascalientes, Aguascalientes, México Vacías 5 (45.5) 4 (23.5)
*** Hamilton Thorn, Animal Reproduction Systems, California, USA.

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 En el Cuadro 1 se muestran los porcentajes obteni- práctica y podría convertirse en un diluyente de
dos de yeguas gestantes con semen refrigerado de amplia utilización.
burro, utilizando los dos diluyentes. Como se puede
observar, la fertilidad fue mayor cuando las yeguas se Referencias
inseminaron con el diluyente experimental (76.5%)
que al inseminarse con el diluyente de Kenney (54.5%),
edigraphic.com
1. Jasko DJ, Bedford SJ, Cook NL, Mumford EL, Squires
aunque los resultados no son significativos debido al EL, Pickett BW. Effects of antibiotics on motion charac-
teristics of cooled stallion spermatozoa. Theriogenology
bajo número de observaciones. 1993;40:885-893.
Los resultados obtenidos con el diluyente de 2. Pickett BW. Collection and evaluation of stallion semen
Kenney en el presente trabajo son muy semejantes a for artificial insemination. In: McKinnon AO, Voss JL,
los obtenidos con el mismo diluyente por Heiskanen editors. Equine reproduction. Philadelphia: Lea and
et al.,9 quienes inseminaron a las yeguas una sola vez Febiger, 1993:746-754.
3. Jasko DJ, Hathaway JA, Schaltenbrand VI. Effect of
36 horas antes de la ovulación, utilizando semen que seminal plasma and egg yolk on motion characteristics
había estado refrigerado hasta por 43 h, obteniendo of cooled stallion spermatozoa. Theriogenology
56% de concepción. Esto último indica que el semen 1992;37:1241-1252.
de burro refrigerado tiene un comportamiento simi- 4. Thacker DL, Almquist JO. Diluters for bovine semen I.
lar al del caballo cuando se utiliza el mismo diluyente. Fertility and motility of bovine spermatozoa in boiled
milk. J Dairy Sci 1953;36:173-180.
En otro experimento realizado en 48 yeguas insemi- 5. Province CA, Squires EL, Pickett BW, Amann RP. Cooling
nadas durante 3 ciclos, utilizando 3 diferentes rates, storages temperatures and fertility of extended
diluyentes (leche descremada calentada, diluyente equine spermatozoa. Theriogenology 1985;23:925-934.
crema-gel, y una mezcla de la mitad del primer 6. Douglas RH, Ginther OJ. Effect of prostaglandin F2 alfa on
length of diestrus in mares. Prostaglandins 1972;2:265-268.
diluyente y la mitad del segundo diluyente) se obtu-
7. Zarco L, Boeta M. Manejo del servicio para lograr ópti-
vieron porcentajes de gestación del 62.5%, 43.8% y ma fertilidad. Memorias del Segundo Curso de Repro-
62.5%, respectivamente.10 Lo anterior indica que re- ducción Equina; 1995 mayo 8-11; México D.F. México
sulta mejor utilizar la leche descremada, ya sea sola (DF): Academia de Investigación en Biología de la Re-
o combinada, que sólo utilizar la gel-crema. Otros producción, 1995:7-14.
8. Kenney RM, Bergman RV, Cooper WL, Morse GW.
autores obtuvieron resultados más favorables utili-
Minimum contamination techniques for breeding ma-
zando como diluyente la leche fresca descremada res: techniques and preliminary findings. Proc Am Assoc
(previamente calentada), que el diluyente EZ-Mixin, Equine Pract 1975;21:327-335.
evaluándolos mediante el porcentaje de recuperación 9. Heiskanen ML, Huhtinen M, Pirhonen A, Maenpaa PM.
de embriones.11 En el presente trabajo los resultados Insemination results with stallion semen stored for two
days. Acta Vet Scand 1994;35:257-262.
obtenidos utilizando leche descremada ultrapasteu-
10. Householder DD, Pickett BW, Voss JL, Olar TT. Effect of
rizada fueron superiores a los obtenidos con el extender, number of spermatozoa and HCG on equine
diluyente de Kenney6 y a los obtenidos por Squires fertility. J Equine Vet Sci 1981;1:9-13.
et al.11 con leche descremada calentada. Sin embar- 11. Squires EL, Amann RP, Mckinnon AO, Pickett BW.
go, es necesario realizar más trabajos para aumentar Fertility of equine spermatozoa cooled to 5 or 20° C.
University College Dublin, Proceedings International
el tamaño de la muestra y confirmar la aparente bon- Congress of Animal Reproduction and Artificial
dad de la utilización de la leche descremada ultra- Insemination; 1988 June 26-30; Dublin Ireland. Dublin
pasteurizada comercial, ya que su utilización es muy (Ireland): 1988:3:297-299.

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