Metabolomic Data Analysis with MetaboAnalyst 6.

Name: guest15821439651105090410

April 24, 2024

1 Data Processing and Normalization

1.1 Reading and Processing the Raw Data

MetaboAnalyst accepts a variety of data types generated in metabolomic studies, including compound
concentration data, binned NMR/MS spectra data, NMR/MS peak list data, as well as MS spectra
(NetCDF, mzXML, mzDATA). Users need to specify the data types when uploading their data in order
for MetaboAnalyst to select the correct algorithm to process them. Table 1 summarizes the result of the
data processing steps.

1.1.1 Reading Peak Intensity Table

The peak intensity table should be uploaded in comma separated values (.csv) format. Samples can be
in rows or columns, with class labels immediately following the sample IDs.

Samples are in columns and features in rows. The uploaded le is in comma separated values (.csv)
format. The uploaded data le contains 124 (samples) by 10660 (peaks(mz/rt)) data matrix.

1.1.2 Data Integrity Check

Before data analysis, a data integrity check is performed to make sure that all the necessary information
has been collected. The class labels must be present and contain only two classes. If samples are paired,
the class label must be from -n/2 to -1 for one group, and 1 to n/2 for the other group (n is the sample
number and must be an even number). Class labels with same absolute value are assumed to be pairs.
Compound concentration or peak intensity values should all be non-negative numbers. By default, all
missing values, zeros and negative values will be replaced by the half of the minimum positive value
found within the data (see next section)

1.1.3 Missing value imputations

Too many zeroes or missing values will cause diculties for downstream analysis. MetaboAnalyst oers
several dierent methods for this purpose. The default method replaces all the missing and zero values
with a small values (the half of the minimum positive values in the original data) assuming to be
the detection limit. The assumption of this approach is that most missing values are caused by low
abundance metabolites ([Link] the detection limit). In addition, since zero values may cause problem
for data normalization (i.e. log), they are also replaced with this small value. User can also specify other
methods, such as replace by mean/median, or use K-Nearest Neighbours (KNN), Probabilistic PCA
(PPCA), Bayesian PCA (BPCA) method, Singular Value Decomposition (SVD) method to impute the
missing values 1 . Please choose the one that is the most appropriate for your data.
1 Stacklies W, Redestig H, Scholz M, Walther D, Selbig J. pcaMethods: a bioconductor package, providing PCA methods
for incomplete data., Bioinformatics 2007 23(9):1164-1167

1
 Zero or missing values were replaced by 1/5 of the min positive value for each variable.

1.1.4 Data Filtering

The purpose of the data ltering is to identify and remove variables that are unlikely to be of use
when modeling the data. No phenotype information are used in the ltering process, so the result
can be used with any downstream analysis. This step can usually improves the results. Data lter is
strongly recommended for datasets with large number of variables (> 250) datasets contain much noise
([Link] data). Filtering can usually improve your results2 .

For data with number of variables < 250, this step will reduce 5% of variables; For variable number
between 250 and 500, 10% of variables will be removed; For variable number bwteen 500 and 1000, 25%
of variables will be removed; And 40% of variabled will be removed for data with over 1000 variables.
The None option is only for less than 5000 features. Over that, if you choose None, the IQR lter will
still be applied. In addition, the maximum allowed number of variables is 10000
No data ltering was performed.

2 Hackstadt AJ, Hess [Link] for increased power for microarray data analysis, BMC Bioinformatics. 2009; 10:
11.

2
 Table 1: Summary of data processing results
Features (positive) Missing/Zero Features (processed)
040524_B1_N4C 9525 1135 10638
040524_B1_N20C 8972 1688 10638
040524_B1_N25C 9811 849 10638
040524_B1_N26C 8991 1669 10638
040524_B1_N33C 9561 1099 10638
040524_B1_N36C 9745 915 10638
040524_B2_N16C 7110 3550 10638
040524_B2_N18C 6167 4493 10638
040524_B2_N34C 8508 2152 10638
040524_B2_N35C 8437 2223 10638
040524_B2_N37C 8287 2373 10638
040624_B3_N3C 6528 4132 10638
040624_B3_N9C 4498 6162 10638
040624_B3_N11C 5432 5228 10638
040624_B3_N12C 5098 5562 10638
040624_B3_N32C 6717 3943 10638
040924_B4_N8C 2243 8417 10638
040924_B4_N10C 4439 6221 10638
040924_B4_N14C 4197 6463 10638
040924_B4_N27C 5181 5479 10638
040924_B4_N43C 4306 6354 10638
041024_B5_N15C 2252 8408 10638
041024_B5_N22C 1374 9286 10638
041024_B5_N23C 4095 6565 10638
041024_B5_N25C 2602 8058 10638
041024_B5_N41C 3948 6712 10638
041124_B6_N30C 4652 6008 10638
040524_B1_QC1 10330 330 10638
040524_B1_QC2 10317 343 10638
040524_B1_QC3 10280 380 10638
040524_B1_QC4 10305 355 10638
040524_B1_QC5 10319 341 10638
040524_B1_QC6 10305 355 10638
040524_B1_QC7 10294 366 10638
040524_B1_QC8 10264 396 10638
040524_B1_QC9 10234 426 10638
040524_B1_QC10 10217 443 10638
040524_B1_QC11 10105 555 10638
040524_B1_QC12 9956 704 10638
040524_B2_QC1 9332 1328 10638
040524_B2_QC2 9317 1343 10638
040524_B2_QC3 9424 1236 10638
040524_B2_QC4 9301 1359 10638
040524_B2_QC5 9316 1344 10638
040524_B2_QC6 9463 1197 10638
040524_B2_QC7 9547 1113 10638
040524_B2_QC8 9480 1180 10638
040524_B2_QC9 9355 1305 10638
040524_B2_QC10 9343 1317 10638
040524_B2_QC11 8756 1904 10638
040524_B2_QC12 8316 2344 10638
040624_B3_QC1 6070 4590 10638
040624_B3_QC2 5958 4702 10638
040624_B3_QC3 6026 4634 10638
040624_B3_QC4 6007 4653 10638
040624_B3_QC5 5851 4809 10638
040624_B3_QC6 5869 4791 10638
040624_B3_QC7 5723 4937 10638
040624_B3_QC8 5631 5029 10638
040624_B3_QC10 5655 5005 10638
040624_B3_QC11 5824 4836 10638
040624_B3_QC12 5402 5258 10638
040924_B4_QC1 4795 5865 10638
040924_B4_QC2 4641 6019 10638
040924_B4_QC3 4819 5841 10638
040924_B4_QC4 4889 5771 10638
040924_B4_QC5 4756 5904 10638
040924_B4_QC6 4766 5894 10638
040924_B4_QC7 4685 5975 10638
040924_B4_QC8 4896 5764 10638
040924_B4_QC9 4627 6033 10638
040924_B4_QC10 4609 6051 10638
040924_B4_QC11 4211 6449 10638
040924_B4_QC12 3989 6671 10638
041024_B5_QC1 4562 6098 10638
041024_B5_QC2 4544 6116 10638
041024_B5_QC3 4463 6197 10638
041024_B5_QC4 4325 6335 10638
041024_B5_QC5 4298 6362 10638
041024_B5_QC6 4277 6383 10638
041024_B5_QC7 4168 6492 10638
041024_B5_QC8 4306 6354 10638
041024_B5_QC9 4103 6557 10638
041024_B5_QC10 4253 6407 10638
041024_B5_QC11 3233 7427 10638
041024_B5_QC12 3343 7317 10638
041124_B6_QC1 4867 5793 10638
041124_B6_QC2 47453 5915 10638
041124_B6_QC3 4759 5901 10638
041124_B6_QC4 4800 5860 10638
041124_B6_QC5 4830 5830 10638
041124_B6_QC6 4921 5739 10638
041124_B6_QC7 4572 6088 10638
1.2 Data Normalization

The data is stored as a table with one sample per row and one variable (bin/peak/metabolite) per
column. The normalization procedures implemented below are grouped into four categories. Sample
specic normalization allows users to manually adjust concentrations based on biological inputs (i.e.
volume, mass); row-wise normalization allows general-purpose adjustment for dierences among samples;
data transformation and scaling are two dierent approaches to make features more comparable. You
can use one or combine both to achieve better results.

The normalization consists of the following options:

1. Row-wise procedures:

ˆ Sample specic normalization (i.e. normalize by dry weight, volume)

ˆ Normalization by the sum
ˆ Normalization by the sample median
ˆ Normalization by a reference sample (probabilistic quotient normalization)3
ˆ Normalization by a pooled or average sample from a particular group
ˆ Normalization by a reference feature (i.e. creatinine, internal control)
ˆ Quantile normalization

2. Data transformation :

ˆ Log transformation (base 10)

ˆ Square root transformation
ˆ Cube root transformation

3. Data scaling:

ˆ Mean centering (mean-centered only)

ˆ Auto scaling (mean-centered and divided by standard deviation of each variable)
ˆ Pareto scaling (mean-centered and divided by the square root of standard deviation of each
variable)
ˆ Range scaling (mean-centered and divided by the value range of each variable)

Figure 1 shows the eects before and after normalization.

Row-wise normalization: Normalization to constant sum; Data transformation: Log10 Normalization;

Data scaling: Autoscaling.

3 Dieterle F, Ross A, Schlotterbeck G, Senn H. Probabilistic quotient normalization as robust method to account for
dilution of complex biological mixtures. Application in 1H NMR metabonomics, 2006, Anal Chem 78 (13);4281 - 4290

4
 Before Normalization After Normalization
2.5e+15
0.012
2.0e+15
0.010
Density

0.008 1.5e+15
0.006 1.0e+15
0.004
5.0e+14
0.002
0.000 0.0e+00

-5.0e-16

5.0e-16
0e+00

2e+05

4e+05

6e+05

8e+05

-2.0e-15

-1.5e-15

-1.0e-15

1.0e-15
0.0e+00
Pos3934 Pos3934
Pos4711 Pos4711
Pos7270 Pos7270
Pos9169 Pos9169
Pos8230 Pos8230
Pos4174 Pos4174
Pos938 Pos938
Pos9293 Pos9293
Pos8510 Pos8510
Pos2663 Pos2663
Pos1372 Pos1372
Pos6069 Pos6069
Pos1927 Pos1927
Pos9660 Pos9660
Pos2212 Pos2212
Pos653 Pos653
Pos8969 Pos8969
Pos1106 Pos1106
Pos5644 Pos5644
Pos3439 Pos3439
Pos5838 Pos5838
Pos6584 Pos6584
Pos2015 Pos2015
Pos1296 Pos1296
Pos7588 Pos7588
Pos572 Pos572
Pos8060 Pos8060
Pos9929 Pos9929
Pos4179 Pos4179
Pos2861 Pos2861
Pos2127 Pos2127
Pos8434 Pos8434
Pos6951 Pos6951
Pos1406 Pos1406
Pos6743 Pos6743
Pos4581 Pos4581
Pos5849 Pos5849
Pos562 Pos562
Pos8135 Pos8135
Pos1118 Pos1118
Pos6449 Pos6449
Pos2849 Pos2849
Pos365 Pos365
Pos7077 Pos7077
Pos8667 Pos8667
Pos9611 Pos9611
Pos8593 Pos8593
Pos6926 Pos6926
Pos4199 Pos4199
Pos8931 Pos8931
-6
0

500000

1000000

1500000

-4

-2

Intensity Normalized Intensity

Figure 1: Box plots and kernel density plots before and after normalization. The boxplots show at most
50 features due to space limit. The density plots are based on all samples.

5
2 Statistical and Machine Learning Data Analysis
MetaboAnalyst oers a variety of methods commonly used in metabolomic data analyses. They include:

1. Univariate analysis methods:

ˆ Fold Change Analysis

ˆ T-tests
ˆ Volcano Plot
ˆ One-way ANOVA and post-hoc analysis
ˆ Correlation analysis

2. Multivariate analysis methods:

ˆ Principal Component Analysis (PCA)

ˆ Partial Least Squares - Discriminant Analysis (PLS-DA)

3. Robust Feature Selection Methods in microarray studies

ˆ Signicance Analysis of Microarray (SAM)

ˆ Empirical Bayesian Analysis of Microarray (EBAM)

4. Clustering Analysis

ˆ Hierarchical Clustering
 Dendrogram
 Heatmap
ˆ Partitional Clustering
 K-means Clustering
 Self-Organizing Map (SOM)
5. Supervised Classication and Feature Selection methods

ˆ Random Forest
ˆ Support Vector Machine (SVM)

Please note: some advanced methods are available only for two-group sample analyais.

6
2.1 Principal Component Analysis (PCA)

PCA is an unsupervised method aiming to nd the directions that best explain the variance in a data
set (X) without referring to class labels (Y). The data are summarized into much fewer variables called
scores which are weighted average of the original variables. The weighting proles are called loadings.
The PCA analysis is performed using the prcomp package. The calculation is based on singular value
decomposition.

The Rscript chemometrics.R is required. Figure 2 is pairwise score plots providing an overview of
the various seperation patterns among the most signicant PCs; Figure 3 is the scree plot showing the
variances explained by the selected PCs; Figure 4 shows the 2-D scores plot between selected PCs; Figure
5 shows the biplot between the selected PCs. Interactive 3-D scores plots are not included here and can
be directly downloaded from website.

-100 -50 0 -20 0 20 40 60

50 100
PC 1

-50 0
55 %

-150
0

PC 2
-50

7.8 %
-100

40
20
PC 3
4%

0
-40 -20
60
40

PC 4
20

3.3 %
0
-20

-30 -20 -10 0 10 20

PC 5
2.1 %

-150 -100 -50 0 50 100 -40 -20 0 20 40 -30 -20 -10 0 10 20

NC QC SC

Figure 2: Pairwise score plots between the selected PCs. The explained variance of each PC is shown in
the corresponding diagonal cell.

7
 Scree plot

%
%
0.8

.2
%

.2

72
70
.8
%

66
.9
62
%
0.6

55
Variance explained

0.4
0.2

%
8

%
7.

%
%

1
3.
4

2.
0.0

1 2 3 4 5

PC index

Figure 3: Scree plot shows the variance explained by PCs. The green line on top shows the accumulated
variance explained; the blue line underneath shows the variance explained by individual PC.

8
 Scores Plot
100

NC
QC
SC
50
PC 2 ( 7.8 %)

0
-50
-100

-200 -100 0 100 200

PC 1 ( 55 %)

Figure 4: Scores plot between the selected PCs. The explained variances are shown in brackets.

9
 -20 -10 0 10

Pos622
Pos112

10
Pos591
Pos173
Pos1005Pos61
Pos119
Pos188
Pos153
Pos796
Pos1067
Pos148
Pos846
Pos11 Pos65
Pos1003
Pos164
Pos50
Pos929
Pos133
Pos131
Pos95 Pos767
Pos58
Pos57
Pos805
Pos280Pos659
Pos279
Pos588
Pos102
Pos118
Pos721Pos172
Pos1034
Pos230
Pos1665
Pos303
Pos1123
Pos224
Pos1068
Pos308
Pos1255 Pos113
Pos210 Pos67
Pos998
Pos1044
Pos890
Pos154
Pos1063
Pos1011
Pos139
Pos175
Pos906
Pos612 Pos41
Pos94
Pos159 Pos915
Pos142
Pos1197
Pos771
Pos223
Pos640
Pos1150
Pos1252
Pos989
Pos115 Pos682
Pos220
Pos919
Pos732
Pos150
Pos152
Pos1925
Pos708
Pos237 Pos313
Pos731
Pos215
Pos1058
Pos610
Pos1016
Pos323
Pos995
Pos626
Pos376
Pos1177
Pos264
Pos1501
Pos1235
Pos996
Pos1761 Pos836
Pos763
Pos695
Pos86
Pos1054
Pos165 Pos66
Pos874
Pos244
Pos32
Pos1173Pos910
Pos664
Pos355
Pos147
Pos980
Pos384 Pos1230
Pos204
Pos1055
Pos1122
Pos1769
Pos2196
Pos1099
Pos636
Pos289
Pos1708
Pos1375
Pos227
Pos202
Pos265
Pos3516 Pos44
Pos697
Pos1498
Pos821Pos759
Pos26
Pos1104
Pos733
Pos36
Pos785
Pos1299 Pos863
Pos872
Pos844
Pos621
Pos1542
Pos241
Pos714
Pos911
Pos1533 Pos14
Pos1158
Pos1077
Pos703
Pos1051 Pos1231
Pos1163
Pos1759
Pos1160
Pos322
Pos1199
Pos370
Pos917
Pos359
Pos1253
Pos298
Pos918
Pos414
Pos453
Pos312
Pos1032 Pos39
Pos135
Pos1664
Pos486 Pos304
Pos91
Pos1075
Pos972
Pos457Pos81
Pos984
Pos331
Pos769
Pos1535
Pos1214
Pos742
Pos1135
Pos1256
Pos676
Pos1249
Pos651
Pos478 Pos166
Pos964
Pos822
Pos1098
Pos1257
Pos931
Pos87
Pos187
Pos1993 Pos98
Pos1118
Pos124
Pos1258
Pos1147
Pos531
Pos229
Pos1217 Pos587
Pos1617
Pos790
Pos718
Pos1287
Pos1192
Pos1372
Pos986
Pos754
Pos225
Pos1351
Pos1106
Pos268
Pos1033
Pos1630
Pos266 Pos38
Pos837
Pos605
Pos713
Pos1140
Pos723
Pos674 Pos144
Pos72
Pos878 Pos2059
Pos660
Pos720
Pos1105
Pos6715
Pos715
Pos631
Pos345
Pos671
Pos793
Pos1229
Pos125 Pos693
Pos735Pos42
Pos1009
Pos471
Pos2328
Pos1722
Pos258
Pos973
Pos833
Pos895
Pos1164
Pos2509
Pos555
Pos1352
Pos1006
Pos1571
Pos454
Pos1582 Pos137
Pos338
Pos783
Pos372
Pos1710
Pos103
Pos1703
Pos305
Pos1201
Pos1186
Pos959
Pos637
Pos1191
Pos1688
Pos847
Pos1668
Pos469
Pos936
Pos1232
Pos400
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Pos9833
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Pos3251
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Pos2582
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Pos4288
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Pos75
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Pos76Pos3956
-0.1

040524_B1_N26C
Pos2236
Pos4613
Pos2105Pos1022 Pos206
Pos3411
Pos3643
Pos377
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Pos607
Pos3196
Pos2260
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Pos3808
Pos3421
Pos207
Pos2451
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Pos3593
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041024_B5_S57C
Pos3785
PC2

Pos3910
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Pos3366
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Pos3772
Pos9756
Pos1990Pos3051
Pos3227
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-10
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-0.2

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-0.3

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-0.4

-0.4 -0.3 -0.2 -0.1 0.0 0.1

PC1

Figure 5: PCA biplot between the selected PCs. Note, you may want to test dierent centering and
scaling normalization methods for the biplot to be displayed properly.

10
2.2 Partial Least Squares - Discriminant Analysis (PLS-DA)

PLS is a supervised method that uses multivariate regression techniques to extract via linear combination
of original variables (X) the information that can predict the class membership (Y). The PLS regression
is performed using the plsr function provided by R pls package4 . The classication and cross-validation
are performed using the corresponding wrapper function oered by the caret package5 .

To assess the signicance of class discrimination, a permutation test was performed. In each permu-
tation, a PLS-DA model was built between the data (X) and the permuted class labels (Y) using the
optimal number of components determined by cross validation for the model based on the original class
assignment. MetaboAnalyst supports two types of test statistics for measuring the class discrimination.
The rst one is based on prediction accuracy during training. The second one is separation distance
based on the ratio of the between group sum of the squares and the within group sum of squares (B/W-
ratio). If the observed test statistic is part of the distribution based on the permuted class assignments,
the class discrimination cannot be considered signicant from a statistical point of view.6 .

There are two variable importance measures in PLS-DA. The rst, Variable Importance in Projection
(VIP) is a weighted sum of squares of the PLS loadings taking into account the amount of explained
Y-variation in each dimension. Please note, VIP scores are calculated for each components. When more
than components are used to calculate the feature importance, the average of the VIP scores are used.
The other importance measure is based on the weighted sum of PLS-regression. The weights are a
function of the reduction of the sums of squares across the number of PLS components. Please note,
for multiple-group (more than two) analysis, the same number of predictors will be built for each group.
Therefore, the coecient of each feature will be dierent depending on which group you want to predict.
The average of the feature coecients are used to indicate the overall coecient-based importance.

Figure 6 shows the overview of scores plots; Figure 7 shows the 2-D scores plot between selected
components; Figure 8 shows the 3-D scores plot between selected components; Figure 9 shows the load-
ing plot between the selected components;Figure 10 shows the classication performance with dierent
number of components; Figure 11 shows the results of permutation test for model validation; Figure 12
shows important features identied by PLS-DA.

4 Ron Wehrens and Bjorn-Helge [Link]: Partial Least Squares Regression (PLSR) and Principal Component Regres-
sion (PCR), 2007, R package version 2.1-0
5 Max Kuhn. Contributions from Jed Wing and Steve Weston and Andre [Link]: Classication and Regression
Training, 2008, R package version 3.45
6 Bijlsma et [Link]-Scale Human Metabolomics Studies: A Strategy for Data (Pre-) Processing and Validation, Anal
Chem. 2006, 78 567 - 574

11
 -150 -50 0 50 100 150 -20 -10 0 10 20 30 40

40
20
Component 1

0
30.7 %

-40 -20
-50 0 50 100150

Component 2
28.2 %
-150

20
0
Component 3

-60 -40 -20

5.1 %
-20-10 0 10 20 30 40

Component 4
2.9 %

30
20
Component 5
10

2.1 %
0
-10

-40 -20 0 20 40 -60 -40 -20 0 20 -10 0 10 20 30

NC QC SC

Figure 6: Pairwise scores plots between the selected components. The explained variance of each com-
ponent is shown in the corresponding diagonal cell.

12
 Scores Plot
200

NC
QC
SC
100
Component 2 ( 28.2 %)

0
-100

-50 0 50

Component 1 ( 30.7 %)

Figure 7: Scores plot between the selected PCs. The explained variances are shown in brackets.

13
 NC
QC
SC
40
20

Component 2 ( 28.2 %)
Component 3 ( 5.1 %)

200
-20

150
100
-40

50
0
-60

-50
-100
-80

-150
-60 -40 -20 0 20 40 60

Component 1 ( 30.7 %)

Figure 8: 3D scores plot between the selected PCs. The explained variances are shown in brackets.

14
 Pos4424
Pos4580
Pos4641 Pos4490
Pos3785
Pos3915
Pos4164
Pos3884
0.015 Pos9161
Pos8645
Pos4193Pos3956
Pos3998
Pos4046
Pos5948
Pos4917
Pos5053 Pos2851
Pos4428 Pos3595 Pos3772
Pos3808
Pos7527 Pos4658 Pos3719 Pos2924
Pos9756
Pos4705
Pos4755
Pos5119 Pos9231
Pos639 Pos978
Pos5267
Pos4101 Pos618
Pos3869
Pos76
Pos4066
0.010 Pos49 Pos40 Pos4335 Pos654
Pos6964
Pos8180
Pos6618 Pos4504
Pos75Pos4417 Pos1114Pos4784
Pos4346
Pos6710 Pos3430
Pos9028
Pos2406 Pos3051
Pos7347Pos768 Pos4279Pos5009 Pos3289
Pos9140
Pos644
Pos8379
Pos8691 Pos624 Pos3704 Pos3806
Pos3411
Pos7039 Pos2867
Pos3593
Pos8621
Pos9014
Pos781 Pos149 Pos10034
Pos4048
Pos4718 Pos1277
Pos1029 Pos3227
Pos3246
Pos3186
Pos85
Pos1 Pos4976
Pos46
Pos3547 Pos82
Pos9354
Pos10083
Pos9183 Pos5420
Pos891
Pos4742Pos4206
Pos794 Pos7687
Pos4452
Pos206 Pos3280
Pos9495
Pos997
Pos3050
Pos2
Pos4995
Pos5 Pos177 Pos6317 Pos1090 Pos3643 Pos3366
Pos1990
0.005 Pos8221Pos9166
Pos634
Pos4853 Pos2311
Pos7181
Pos7024
Pos9018 Pos62
Pos809 Pos625Pos104 Pos3962
Pos10022
Pos80 Pos2392
Pos2570
Pos8538
Pos7983Pos629 Pos5376
Pos143
Pos24 Pos730 Pos1031
Pos185
Pos1038 Pos3028
Pos1363
Pos778
Pos1620 Pos3421
Pos5235
Pos709
Pos701
Pos9291 Pos4 Pos1791
Pos4906
Pos116
Pos977 Pos1811
Pos205
Pos6653 Pos1370
Pos1237 Pos1971 Pos3196
Pos3364
Pos877
Pos784
Pos7Pos47
Pos25 Pos5002 Pos151
Pos1276 Pos4672 Pos1954
Pos4327
Pos3464 Pos1807
Pos136
Pos747 Pos59Pos641
Pos1381
Pos5651
Loadings 2

Pos9504
Pos704 Pos8 Pos6425
Pos792 Pos15 Pos646
Pos1506
Pos1206 Pos945
Pos2454
Pos83
Pos643
Pos1638 Pos1343
Pos1338
Pos9833
Pos4613
Pos1022
Pos3596
Pos2030
Pos7364
Pos309
Pos2236
Pos607
Pos638 Pos12
Pos3296
Pos10269
Pos129
Pos1362
Pos4041 Pos263
Pos6403
Pos64
Pos192
Pos70
Pos807 Pos4901 Pos4089 Pos3041
Pos648Pos10268
Pos207 Pos377
Pos324
Pos3427
Pos1082
Pos857 Pos3856
Pos1321
Pos2059
Pos3036
Pos34 Pos663
Pos9
Pos684 Pos30
Pos885 Pos592
Pos5268
Pos31
Pos7745 Pos2127
Pos4999 Pos2038
Pos5777 Pos2525
Pos2349
Pos5687
Pos2455Pos2451
Pos1468
Pos6093
Pos2579
Pos2910
Pos10 Pos90Pos6
Pos56Pos712 Pos33
Pos3861
Pos22 Pos820
Pos8983
Pos29
Pos3987
Pos735 Pos1285
Pos2151 Pos68 Pos93
Pos787Pos1652
Pos74 Pos4808
Pos4135
Pos2723
Pos2773
Pos3133 Pos2833
Pos4179
0.000 Pos3463
Pos600 Pos73
Pos3565
Pos3750 Pos8330
Pos84
Pos5072
Pos589
Pos1726
Pos2513 Pos117 Pos627
Pos199
Pos6200 Pos3920
Pos8551
Pos3151
Pos8093
Pos866
Pos6589
Pos45
Pos810
Pos5969
Pos755
Pos595 Pos2598
Pos8097
Pos361 Pos4800
Pos155
Pos1696
Pos1749Pos5197 Pos2260
Pos4021
Pos3417
Pos3012 Pos2783
Pos2707
Pos3695
Pos2105
Pos3318
Pos3660
Pos2582
Pos1410
Pos6824 Pos2719
Pos693
Pos53
Pos843 Pos38 Pos1600
Pos55
Pos3056
Pos2365
Pos2692
Pos3288
Pos3175 Pos17
Pos3096Pos7395
Pos720
Pos2624
Pos815
Pos2770 Pos13
Pos1436
Pos834
Pos1382
Pos21
Pos667
Pos140
Pos2590
Pos774
Pos801 Pos826
Pos197Pos1175
Pos261
Pos851
Pos8834
Pos5101
Pos5968 Pos5353
Pos1234
Pos786
Pos3001
Pos858
Pos7119
Pos5472
Pos1471 Pos6358
Pos1865
Pos1511
Pos2275
Pos1738Pos2588
Pos831
Pos950
Pos1324 Pos4104
Pos5259
Pos3235
Pos1326
Pos716
Pos1250
Pos100 Pos5329
Pos2221 Pos455
Pos3714
Pos2854
Pos2660
Pos837 Pos2658
Pos2720Pos1105
Pos2544
Pos3977
Pos3496
Pos737 Pos19
Pos2754
Pos4475
Pos1026
Pos1208Pos52
Pos3 Pos198
Pos827
Pos1042
Pos2628
Pos599
Pos1497
Pos5603
Pos6530
Pos1742
Pos1910
Pos170
Pos1499 Pos1536
Pos1001
Pos1103
Pos2466
Pos3200
Pos841Pos4199
Pos8827
Pos1059 Pos3721
Pos8879
Pos6580
Pos608
Pos145
Pos1254
Pos5262Pos2149
Pos753
Pos340
Pos190
Pos3908
Pos1083 Pos1374
Pos5703
Pos5527
Pos5103
Pos2603 Pos3507
Pos2677
Pos3251Pos2366
Pos1564
Pos2019
Pos3749
Pos609 Pos3100
Pos3020
Pos3187
Pos850
Pos77Pos28
Pos863 Pos1134
Pos1152
Pos1077 Pos18
Pos3734 Pos127
Pos4489
Pos195
Pos838
Pos7839Pos939
Pos1670
Pos830
Pos620 Pos4289
Pos2538
Pos2651
Pos285
Pos1018
Pos3838
Pos1629
Pos10527
Pos652 Pos2264
Pos1570
Pos1876
Pos1337
Pos956
Pos7210
Pos1515
Pos596
Pos209 Pos447
Pos982
Pos1039
Pos845
Pos835
Pos719 Pos398
Pos2123
Pos314 Pos3291
Pos1345
Pos1021 Pos2340
Pos7001
Pos336
Pos1415
Pos2482
Pos2846
Pos6102 Pos1561
Pos2796
Pos3006
Pos6230
Pos4594Pos1455
Pos657
Pos5112
Pos4210
Pos4654Pos2462
Pos1204
Pos5165
Pos2978
Pos42
Pos653Pos1158 Pos27
Pos697
Pos839 Pos669
Pos2969
Pos3661
Pos3063
Pos2915
Pos789
Pos108
Pos598 Pos955
Pos852 Pos590
Pos2412Pos1528
Pos4361
Pos3426
Pos817
Pos2848
Pos247
Pos876
Pos2169 Pos7594
Pos1656
Pos1078
Pos954
Pos688
Pos937 Pos3575
Pos1538
Pos871
Pos10039
Pos1697
Pos380
Pos985
Pos1174
Pos6515
Pos2446
Pos7945
Pos6492 Pos776
Pos3628
Pos924
Pos777 Pos5043
Pos1437
Pos7623
Pos328
Pos1973 Pos4434
Pos3314
Pos2165
Pos6504
Pos1671Pos4801
Pos1389
Pos2126
Pos4915
Pos3568 Pos4558
Pos864
Pos200
Pos5325
Pos3118
Pos7407
Pos2184
Pos5784
Pos6660
Pos1608 Pos3837
Pos3062
Pos1266
Pos278
Pos3760
Pos6263
Pos1552 Pos617
Pos290
Pos2989
Pos4357
Pos5976
Pos3470
Pos2542
Pos44 Pos141
Pos800
Pos16
Pos915
Pos821 Pos4332
Pos6477
Pos138 Pos78
Pos4128
Pos802
Pos775Pos5178
Pos1693
Pos1946
Pos1394
Pos711
Pos3792 Pos2217
Pos99
Pos962
Pos249
Pos678 Pos182
Pos3500
Pos3542
Pos3604
Pos240
Pos738
Pos4267 Pos2088
Pos3591
Pos1735
Pos317
Pos5955
Pos1733
Pos4064
Pos2718
Pos2136
Pos1803
Pos1004
Pos2613
Pos873
Pos476
Pos686
Pos4349
Pos2523
Pos8146
Pos5183
Pos2159
Pos88
Pos1178
Pos7261 Pos8082
Pos743
Pos1647 Pos2597
Pos8154
Pos4687Pos1385
Pos6498
Pos9033
Pos5428
Pos1418
Pos901
Pos54
Pos1306
Pos2661 Pos772
Pos6433
Pos6465 Pos7973
Pos360
Pos1451
Pos10095
Pos2920
Pos6176
Pos4609Pos1439
Pos1465
Pos6072
Pos8358
Pos2336
Pos1715
Pos5170 Pos5541
Pos4733
Pos7425
Pos8630 Pos2577
Pos2632
Pos286
Pos374
Pos2809
Pos1409
Pos3098
Pos2752
Pos3259
Pos4067
Pos3873 Pos7411
Pos226
Pos130
Pos14
Pos759
Pos26
Pos1009 Pos660
Pos682
Pos57Pos1104
Pos882
Pos144 Pos281
Pos35
Pos976
Pos910
Pos3716
Pos664
Pos758 Pos650
Pos2234
Pos964
Pos700
Pos621
Pos631Pos957 Pos269
Pos1084
Pos729
Pos661
Pos7164
Pos1542Pos5928
Pos107 Pos728
Pos1627
Pos860
Pos9000
Pos724 Pos222
Pos6058
Pos6424
Pos1264
Pos2777
Pos10628
Pos2135
Pos2347 Pos287
Pos1736 Pos368
Pos655
Pos1072
Pos1399
Pos1027
Pos8160 Pos232
Pos2079
Pos2490
Pos967
Pos7512
Pos1096
Pos1216
Pos156
Pos254 Pos6627
Pos1286
Pos4270
Pos2428
Pos3083
Pos6234
Pos1041
Pos1396
Pos2170 Pos3375
Pos3010
Pos788
Pos1927
Pos5554
Pos1701
Pos10375
Pos2193 Pos4946
Pos3851
Pos4351
Pos798Pos1262
Pos6207 Pos5961
Pos5010
Pos3910
Pos7677
Pos311
Pos5540
Pos4049
Pos2468
Pos3707
Pos2756
Pos7321 Pos3530
Pos960Pos6587
Pos5163
Pos2053 Pos690
Pos2803
Pos2806
Pos3393
Pos4760
Pos3252 Pos2422
Pos2228
Pos7142
Pos4008
Pos3825
Pos3965
Pos5078
Pos5185
Pos3668
Pos1512
Pos4611
Pos5907
Pos3067Pos2456
Pos2562
Pos4372
Pos7098
Pos5510
Pos2338 Pos3355
Pos779
Pos898
Pos605Pos874
Pos1025
Pos658
Pos745
Pos919
Pos220
Pos647
Pos666 Pos824
Pos3835
Pos748
Pos3826
Pos7947
Pos935
Pos1498
Pos587
Pos5556
Pos101
Pos975
Pos36
Pos178 Pos96
Pos619
Pos2625
Pos870
Pos7931 Pos7603
Pos969
Pos238
Pos7359
Pos10476
Pos5283
Pos795
Pos2265
Pos2909
Pos5760
Pos354 Pos1752
Pos8009
Pos167
Pos1507
Pos4852
Pos994 Pos2644
Pos1794
Pos816
Pos1112
Pos132 Pos5628 Pos2714
Pos2717
Pos3273
Pos635
Pos9445
Pos448
Pos9616
Pos3722
Pos2576
Pos2892 Pos602
Pos513
Pos7614
Pos2505
Pos5514
Pos1653
Pos811
Pos302Pos1202
Pos2879 Pos7466
Pos1467
Pos5775
Pos1773
Pos3104
Pos297
Pos7984 Pos2254
Pos3549
Pos2298
Pos7087
Pos8622
Pos1060
Pos346
Pos7262
Pos1970
Pos10467
Pos8975 Pos5923
Pos9171
Pos2335
Pos5016
Pos3533
Pos441
Pos4796 Pos4645
Pos3249
Pos479
Pos500
Pos5893
Pos3779Pos614 Pos4925
Pos3311
Pos6163
Pos332
Pos5739
Pos3159
Pos8854
Pos7610
Pos4325
Pos2049
Pos4081
Pos4662
Pos1238
Pos1944
Pos6080 Pos9886
Pos5970
Pos5503 Pos10154
Pos6336
Pos4804
Pos2730
Pos2818 Pos1466
Pos3992
Pos2872
Pos3008
Pos5107
Pos2231
Pos9340
Pos1867 Pos8634
Pos2563
Pos3195
Pos4831
Pos2850
Pos4230
Pos3768
Pos4507
Pos4211
Pos4093 Pos3454
Pos2600
Pos3957
Pos5566
Pos6260
Pos489
Pos1356
Pos5056
Pos7469
Pos5872
Pos2018
Pos4631
Pos4037
Pos7784
Pos6181 Pos1833
Pos3540
-0.005 Pos58
Pos69
Pos853 Pos840
Pos752 Pos983
Pos849
Pos1020
Pos66
Pos260
Pos51 Pos1030
Pos921
Pos2556 Pos710
Pos3554
Pos1019
Pos1988
Pos1856
Pos6617
Pos763
Pos705
Pos215
Pos1002Pos171
Pos7271
Pos241
Pos3476
Pos926 Pos97
Pos174
Pos1500
Pos294Pos89
Pos971Pos1684
Pos1037
Pos1093
Pos3509
Pos649 Pos1581
Pos7673
Pos1227
Pos1802
Pos1789
Pos2460
Pos203
Pos2599
Pos2476
Pos1527
Pos3832
Pos358 Pos4392
Pos1633 Pos5248
Pos235
Pos4578
Pos7724
Pos1756
Pos3169
Pos506
Pos7254
Pos2450
Pos4399
Pos1125
Pos2367
Pos2922
Pos3312
Pos92
Pos2285
Pos1686
Pos3876
Pos1704
Pos1602
Pos3532
Pos1532
Pos2372 Pos1866
Pos4123
Pos7686
Pos3543
Pos7831
Pos897 Pos3680
Pos9755
Pos1388
Pos7034
Pos3442
Pos2835
Pos1909
Pos5828
Pos276
Pos184
Pos6733 Pos4451
Pos6895
Pos4874
Pos3820
Pos1980
Pos2402
Pos1942 Pos7966
Pos5411
Pos886
Pos5812
Pos3429
Pos1308
Pos3846Pos480 Pos4571
Pos4873
Pos1328
Pos6776
Pos3508
Pos597
Pos2769
Pos2849
Pos7877
Pos1590Pos2440Pos2760
Pos2472
Pos7998
Pos1508
Pos1597 Pos6541 Pos3384
Pos2813
Pos8412
Pos4268
Pos2220
Pos9728
Pos9012
Pos2055
Pos6725
Pos1744
Pos6690
Pos6244
Pos2209
Pos8480
Pos1478
Pos7609
Pos1720 Pos3945
Pos2828
Pos4288
Pos4709
Pos2998Pos2695
Pos2355
Pos4635
Pos3472
Pos8380
Pos6854Pos6606
Pos2467
Pos5066
Pos5238
Pos4359
Pos2084
Pos4617
Pos231
Pos5694
Pos3414 Pos3415
Pos4772
Pos6861
Pos1035
Pos3021
Pos5060
Pos4018Pos3124
Pos3019
Pos4054
Pos2652
Pos4057
Pos4552
Pos3220
Pos5713
Pos3688
Pos3106 Pos1416
Pos2413
Pos1667
Pos3696
Pos656
Pos946
Pos23
Pos2859 Pos1064
Pos713
Pos164
Pos175 Pos848
Pos714
Pos63 Pos2116
Pos109
Pos194
Pos102 Pos1097
Pos270
Pos8540
Pos2458
Pos685
Pos861
Pos718
Pos1017
Pos2411
Pos869 Pos707
Pos7196
Pos120
Pos1933
Pos2050
Pos1075
Pos1474
Pos7309
Pos2232
Pos3776
Pos2394
Pos3630 Pos2207
Pos1792
Pos3055
Pos392Pos2447
Pos2869
Pos256
Pos5020
Pos2357
Pos307
Pos722
Pos6955
Pos934
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Pos4789
Pos7448
Pos4606
Pos6825
Pos6242
Pos8416
Pos6241
Pos8458
Pos8289
Pos6764Pos6961
Pos4493
Pos2494Pos5753
Pos10635
Pos6320
Pos3121
Pos7096
Pos4643
Pos4131
Pos8541
Pos9713
Pos3894
Pos6098
Pos8092
Pos623
Pos7437
Pos6441
Pos5467
Pos5436
Pos3455
Pos4954
Pos3745
Pos8616
Pos5450
Pos3850
Pos6407
Pos9015
Pos4418
Pos9260
Pos4368
Pos2795 Pos7891
Pos6511
Pos5242
Pos3798 Pos6737
Pos773
Pos202Pos1640
Pos1217
Pos216
Pos1191
Pos2371
Pos1107 Pos295
Pos494
Pos673
Pos1014 Pos7393
Pos420
Pos616
Pos1176
Pos357
Pos1957
Pos1268
Pos1232
Pos1110 Pos2255
Pos504
Pos3488
Pos2379
Pos362
Pos363
Pos3951
Pos1340
Pos1395
Pos3467 Pos3964
Pos4888
Pos1674
Pos7066
Pos2829
Pos3484
Pos2137
Pos675 Pos553
Pos2831
Pos1420
Pos6795
Pos2568
Pos418
Pos1454
Pos534
Pos1914Pos2103
Pos530
Pos4977
Pos536
Pos4348
Pos3191
Pos7880
Pos524
Pos2672
Pos3536
Pos1350
Pos2035
Pos4450
Pos5304
Pos6283
Pos1543Pos4614
Pos4309
Pos5186
Pos6908
Pos2820
Pos1522
Pos3293
Pos1207 Pos4192
Pos427
Pos481
Pos808
Pos3967
Pos1010
Pos1424
Pos832 Pos2860
Pos2141
Pos916
Pos1101
Pos2294
Pos2181 Pos8368
Pos9326
Pos5415
Pos3933
Pos3376
Pos4011
Pos5015
Pos1431
Pos4115
Pos2800
Pos3237
Pos3447
Pos5482
Pos300
Pos9356
Pos1861
Pos2913Pos439
Pos3456
Pos2154
Pos3215
Pos4278
Pos4974
Pos7373
Pos1225
Pos2132
Pos2655
Pos3830
Pos3487
Pos4692
Pos4208
Pos2258
Pos2408
Pos2983
Pos539 Pos556
Pos3627
Pos1921
Pos5373
Pos2074
Pos2748
Pos7930 Pos8649
Pos2507
Pos1830
Pos8141 Pos5586
Pos545
Pos1760
Pos1636
Pos6258
Pos1390
Pos5665
Pos365
Pos3859
Pos1844
Pos2826
Pos508
Pos1682 Pos3466
Pos1709
Pos1884
Pos537
Pos8448
Pos1628
Pos1734
Pos1548
Pos2478
Pos6615
Pos1813
Pos1442
Pos6810
Pos496
Pos6253
Pos4078
Pos1438
Pos1595
Pos1313
Pos1051 Pos3114
Pos2008
Pos5847
Pos7227
Pos1551
Pos3558 Pos7822
Pos4748
Pos4908
Pos4600
Pos8695Pos7611
Pos10551
Pos10355
Pos4445
Pos7467
Pos6456
Pos4437
Pos3075
Pos4671
Pos6090
Pos4183
Pos6707
Pos4929
Pos4903
Pos6445Pos6939
Pos3708
Pos7852
Pos5551
Pos4059Pos9515
Pos5292
Pos2052
Pos1187 Pos6019
Pos3972
Pos4203
Pos5864
Pos5742
Pos2990 Pos9693
Pos8525
Pos6863
Pos2738Pos7589
Pos7380
Pos3178 Pos5441
Pos4632
Pos502 Pos6547
Pos6087
Pos6917
Pos7574
Pos4805 Pos4282
Pos9736
Pos2003
Pos2549
Pos7781
Pos6472
Pos8774
Pos5984
Pos5951
Pos4763
Pos8494
Pos3040 Pos7878
Pos5385
Pos8296
Pos9193
Pos6201
Pos5093
Pos6845
Pos6932
Pos5409
Pos6239
Pos8813
Pos547
Pos1991
Pos1483
Pos1996
Pos1935
Pos3588
Pos2799Pos6888
Pos8890
Pos6103
Pos250 Pos8066
Pos7657
Pos1906
Pos6195 Pos4373
Pos6636
Pos8509
Pos7226
Pos5399
Pos4537
Pos2893
Pos5328
Pos5593
Pos2762
Pos2814 Pos5936
Pos6113
Pos5091
Pos1872
Pos8973
Pos2759
Pos6644
Pos7222 Pos6116
Pos7311
Pos4121
Pos5282
Pos3647 Pos5869
Pos5142
Pos4943
Pos5892
Pos8388
Pos4460
Pos1797
Pos4691
Pos7856 Pos6119
Pos4547
Pos5886
Pos1679
Pos3140
Pos4664
Pos4970
Pos2642
Pos3049
Pos2776
Pos3209 Pos9337
Pos9365
Pos9180
Pos9416
Pos8490
Pos9343
Pos9331
Pos8722
Pos9361
Pos7697
Pos9042
Pos9325
Pos9347
Pos9346
Pos9221
Pos9336
Pos10621
Pos8950
Pos6716
Pos4294
Pos2238
Pos2787 Pos6921
Pos8705
Pos6996
Pos4644
Pos5484
Pos7848
Pos2487
Pos5359 Pos2241
Pos3182
Pos3852
Pos1430
Pos4311
Pos3132
Pos5426
Pos1786
Pos2868
Pos4321
Pos1119 Pos7409
Pos5263
Pos9609
Pos2083
Pos965
Pos2630
Pos2493Pos3726
Pos5520 Pos8037
Pos6290
Pos4010
Pos5723
Pos4506
Pos4716
Pos3462
Pos7071
Pos6458
Pos4532
Pos4782
Pos3842
Pos2957
Pos3817
Pos1776 Pos8503
Pos9852
Pos6136
Pos8245
Pos5087
Pos5074
Pos6423
Pos3553 Pos7392
Pos6344
Pos7477
Pos3465
Pos9863
Pos3141
Pos4572
Pos3840
Pos4864
Pos5049 Pos6111
Pos4382
Pos4816
Pos6202
Pos8195
Pos9538
Pos3358
Pos6428
Pos9937
Pos1894
Pos1702
Pos4551 Pos3137Pos6439
Pos10559
Pos6467
Pos6973
Pos4302
Pos8791
Pos3450
Pos4622
Pos2594
Pos8122
Pos8419
Pos3955
Pos8535
Pos4412
Pos5059
Pos4670
Pos5731 Pos6291
Pos1486
Pos2686 Pos8718
Pos1700
Pos4442
Pos5465
Pos4030
Pos3774
Pos4264Pos8311
Pos3228
Pos3889
Pos6189
Pos4034
Pos2208
Pos4905
Pos7457 Pos5964
Pos3164
Pos3703
Pos5547
Pos5616
Pos1559
Pos1623
Pos337 Pos8663
Pos8858
Pos6469
Pos4449
Pos4086
Pos7067
Pos7899
Pos8446
Pos6933
Pos4467 Pos6867
Pos7228
Pos6778
Pos10395
Pos2758
Pos2688
Pos3337 Pos3374
Pos3694
Pos1405Pos6285
Pos3444
Pos2971
Pos2277
Pos1120
Pos1448
Pos5089
Pos2896
Pos9314Pos5937
Pos7129
Pos2370
Pos3625
Pos8956
Pos7206 Pos7585
Pos6018
Pos6977
Pos5690
Pos2635
Pos7538
Pos3823
Pos7330
Pos5318
Pos2091
Pos2481
Pos5641
Pos6313
Pos7061
Pos4344
Pos7955
Pos8059
Pos1463
Pos2279 Pos4510
Pos4056
Pos428 Pos6944
Pos7132
Pos4085
Pos9112
Pos2376Pos10600
Pos7190
Pos4968
Pos8938
Pos4546
Pos5273
Pos429
Pos6027
Pos3639
Pos1824 Pos8064
Pos4432
Pos3970
Pos4947
Pos6328
Pos6051 Pos5296
Pos6054
Pos4994
Pos7994
Pos5759
Pos1940
Pos535
Pos6044
Pos3935
Pos434 Pos6972
Pos3973
Pos4274
Pos4509
Pos1606 Pos8464
Pos4397
Pos5026Pos4911
Pos6938
Pos6870
Pos5205
Pos6382
Pos3990
Pos3135
Pos106 Pos471
Pos1826
Pos1755
Pos128 Pos503
Pos999 Pos382
Pos516
Pos498
Pos1353
Pos509 Pos2360
Pos5307
Pos3674
Pos572
Pos1860
Pos2078
Pos1428Pos1422
Pos1557
Pos1582
Pos495 Pos1443
Pos2992
Pos1323
Pos1366
Pos6837
Pos1662
Pos4444
Pos1743
Pos1801
Pos3420
Pos430 Pos6129
Pos2162
Pos1898
Pos1626
Pos518
Pos2830
Pos5496
Pos425
Pos1052
Pos1452
Pos3193
Pos2931 Pos239
Pos1560
Pos5004
Pos1400
Pos512 Pos2082
Pos492
Pos2729
Pos514
Pos5110
Pos1371Pos5735 Pos2741
Pos8316
Pos2891
Pos6603
Pos5370
Pos1386
Pos3148
Pos5276Pos6886
Pos402
Pos1965 Pos10138
Pos3528
Pos7906
Pos5222
Pos6646
Pos3675
Pos3827
Pos3257
Pos3407
Pos1556
Pos5055
Pos6319
Pos3030
Pos6493
Pos4177
Pos4291
Pos3777
Pos4642
Pos6856
Pos1915 Pos10180
Pos6077
Pos6357
Pos7244
Pos2743
Pos9209
Pos8236
Pos4846
Pos7895
Pos5732
Pos4464
Pos3425
Pos2972
Pos7825
Pos3037
Pos2198
Pos2096
Pos4912
Pos5477
Pos5251
Pos7124
Pos3087
Pos4478
Pos3409Pos6949
Pos9329
Pos4433
Pos9821
Pos3863
Pos4387
Pos9557
Pos5538
Pos5316
Pos4587
Pos310
Pos2823
Pos4388
Pos7008
Pos8277
Pos6930
Pos9355
Pos5511
Pos3327
Pos6727
Pos5758
Pos2409
Pos7135 Pos10123
Pos6903
Pos6427
Pos4363
Pos10198Pos4306
Pos7357
Pos8625
Pos4075
Pos5850
Pos4491
Pos8039
Pos6902
Pos3875
Pos456
Pos2138
Pos6689
Pos459
Pos4592
Pos2949
Pos2569
Pos4756
Pos391
Pos1346
Pos7600
Pos1449 Pos5490
Pos7165
Pos8145
Pos3326
Pos271
Pos2142
Pos2691 Pos6318
Pos4500
Pos2500
Pos5533
Pos5223
Pos5071
Pos5587
Pos2659
Pos5023
Pos4007
Pos6378
Pos3120
Pos5121
Pos1635 Pos5046
Pos3784
Pos3925
Pos3775
Pos4222
Pos5548
Pos6470
Pos7676
Pos3740
Pos5345
Pos2918
Pos4753
Pos7128
Pos7371
Pos1302
Pos5898
Pos2361Pos4352
Pos3870
Pos7052
Pos6409
Pos6773
Pos4189
Pos2881
Pos5800
Pos6118
Pos7883
Pos2811
Pos3874
Pos3101
Pos5461
Pos5024
Pos3690
Pos4402
Pos507
Pos3597
Pos2837
Pos3351 Pos3866
Pos2657
Pos3662
Pos1520 Pos7954
Pos6000
Pos7249
Pos3634
Pos3862
-0.015 Pos1351
Pos225 Pos272
Pos1603
Pos1832 Pos5417
Pos1763
Pos1074
Pos475
Pos1426
Pos464
Pos1588
Pos528
Pos958 Pos404
Pos1357
Pos1376 Pos5778
Pos1817
Pos1305
Pos5876Pos2793
Pos1387
Pos7523
Pos2037Pos3365
Pos2256 Pos5637
Pos5174
Pos1800 Pos5529
Pos6591
Pos8194
Pos8746
Pos526
Pos3198
Pos3747 Pos4102
Pos5620
Pos8401
Pos5728
Pos6082
Pos5067
Pos3589
Pos1717
Pos4172
Pos6732
Pos3270
Pos8192Pos6686
Pos3185
Pos306 Pos5040
Pos4845
Pos1847
Pos7162
Pos6649
Pos1780
Pos5729
Pos2712
Pos4231
Pos1718
Pos5841
Pos7095
Pos6561
Pos3342
Pos4406
Pos5865
Pos5681
Pos3666
Pos6088
Pos6005
Pos3068
Pos1456
Pos6026
Pos5806
Pos4585 Pos7980
Pos3059
Pos3757
Pos8292
Pos4257
Pos2711
Pos3948
Pos4254
Pos1124
Pos3027
Pos2947
Pos4678
Pos3864
Pos6730
Pos2615
Pos4124
Pos4324
Pos736
Pos2425
Pos2068 Pos5791
Pos4496
Pos4296
Pos3267
Pos4482
Pos1380
Pos2839
Pos2158
Pos3004
Pos4877
Pos5570
Pos2313
Pos4713
Pos465 Pos3813
Pos865
Pos1479
Pos1092
Pos2148
Pos1220Pos1245
Pos160 Pos1554
Pos5041
Pos2785
Pos5085Pos4384
Pos6238
Pos2224 Pos4436
Pos4955
Pos3287
Pos4951
Pos1401
Pos1540
Pos4329
Pos6249
Pos3563
Pos1877
Pos4859
Pos1711Pos5042
Pos6667
Pos2583
Pos342
Pos339 Pos387
Pos1091 Pos525
Pos2289
Pos3632
Pos4779
Pos1181
-0.04

-0.02

0.00

0.02

0.04

Loadings 1

Figure 9: Loadings plot between the selected PCs.

15
 C
C

SC
Q
N
Pos1370
Pos1620
Pos1363
Pos1811
High
Pos108
Pos1343
Pos1338
Pos2653
Pos4784
Pos1237
Pos1031
Low
Pos646
Pos951
Pos1029
Pos1277

4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0

VIP scores

Figure 10: Important features identied by PLS-DA. The colored boxes on the right indicate the relative
concentrations of the corresponding metabolite in each group under study.

16
3 Appendix: R Command History
[1] "mSet<-InitDataObjects(\"pktable\", \"stat\", FALSE)"
[2] "mSet<-[Link](mSet, \"Replacing_with_your_file_path\", \"colu\", \"disc\");"
[3] "mSet<-SanityCheckData(mSet)"
[4] "mSet<-SanityCheckData(mSet)"
[5] "mSet<-ReplaceMin(mSet);"
[6] "mSet<-SanityCheckData(mSet)"
[7] "mSet<-SanityCheckData(mSet)"
[8] "mSet<-FilterVariable(mSet, \"F\", 25, \"none\", -1, \"mean\", 0)"
[9] "mSet<-PreparePrenormData(mSet)"
[10] "mSet<-SanityCheckData(mSet)"
[11] "mSet<-FilterVariable(mSet, \"F\", 25, \"none\", -1, \"mean\", 0)"
[12] "mSet<-PreparePrenormData(mSet)"
[13] "mSet<-Normalization(mSet, \"SumNorm\", \"LogNorm\", \"AutoNorm\", ratio=FALSE, ratioNum=20)"
[14] "mSet<-PlotNormSummary(mSet, \"norm_0_\", \"png\", 72, width=NA)"
[15] "mSet<-PlotSampleNormSummary(mSet, \"snorm_0_\", \"png\", 72, width=NA)"
[16] "mSet<-[Link](mSet)"
[17] "mSet<-PlotPCAPairSummary(mSet, \"pca_pair_0_\", \"png\", 72, width=NA, 5)"
[18] "mSet<-PlotPCAScree(mSet, \"pca_scree_0_\", \"png\", 72, width=NA, 5)"
[19] "mSet<-PlotPCA2DScore(mSet, \"pca_score2d_0_\", \"png\", 72, width=NA, 1,2,0.95,0,0, \"na\")"
[20] "mSet<-PlotPCALoading(mSet, \"pca_loading_0_\", \"png\", 72, width=NA, 1,2);"
[21] "mSet<-PlotPCABiplot(mSet, \"pca_biplot_0_\", \"png\", 72, width=NA, 1,2)"
[22] "mSet<-PlotPCA3DLoading(mSet, \"pca_loading3d_0_\", \"json\", 1,2,3)"
[23] "mSet<-[Link](mSet, reg=TRUE)"
[24] "mSet<-PlotPLSPairSummary(mSet, \"pls_pair_0_\", \"png\", 72, width=NA, 5)"
[25] "mSet<-PlotPLS2DScore(mSet, \"pls_score2d_0_\", \"png\", 72, width=NA, 1,2,0.95,0,0, \"na\")"
[26] "mSet<-PlotPLS3DScoreImg(mSet, \"pls_score3d_0_\", \"png\", 72, width=NA, 1,2,3, 40)"
[27] "mSet<-PlotPLSLoading(mSet, \"pls_loading_0_\", \"png\", 72, width=NA, 1, 2);"
[28] "mSet<-PlotPLS3DLoading(mSet, \"pls_loading3d_0_\", \"json\", 1,2,3)"
[29] "mSet<-[Link](mSet, \"pls_imp_0_\", \"png\", 72, width=NA, \"vip\", \"Comp. 1\", 15,FALSE)"
[30] "mSet<-SaveTransformedData(mSet)"
[31] "mSet<-PreparePDFReport(mSet, \"guest15821439651105090410\")\n"



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Linux, version: -Ubuntu SMP Tue Mar 5 [Link] UTC 2024 .

17