Transporte a través de membranas
Dra Evelin Rojas
Membranas
Funcione
s
Separar célula
del medio externo
Compartamentalización
Barrera para el
paso para sustancias
iónicas y polares
Iones , piruvato
Aminoácidos, H2O
u otros
Sistemas de transporte
Proteínas transportadoras específicas
Transporte a través de membranas
Cantidad de sustancia transportada
Membrana
Medio interno Medio externo
Concentración de la sustancia a ambos lados de la membrana
Potencial de membrana
Diferencia de potencial químico
Diferencia de potencial eléctrico
Transporte a través de membranas
Característica No Mediado Mediado
Mecanismo Difusión simple Proteínas
transportadoras
específicas
Fuerza impulsora Gradiente de
potencial químico
Gradiente de
concentración a
través de membrana
Transporte del
compuesto
Naturaleza química
(No polares)
Ej. Esteroide, O2
Magnitud del
gradiente
Solubilidad en el
núcleo no polar
Transporte mediado
Transporte mediado pasivo (difusión facilitada)
↑ [ ] ↓ [ ]
Transporte activo
↑ [ ]↓ [ ]
• A favor del gradiente (favorable)
• En contra del gradiente (no favorable)
• Acopla a proceso exergónico → Favorece
Transporte mediado pasivo
Proteínas transportadoras
Permeasas
Canales
• Estructura
• Mecanismos
• Selectividad
Diferentes
Transporte mediado pasivo. Ionóforos
• Generalmente de origen bacteriano
• Aumentan permeabilidad de la membrana a iones
• Difusión pasiva en cualquier dirección
• Dos tipos principales:
• Transportadores
Ión seleccionado →une a él → difunde→ libera ión al
otro lado de
la membrana
• Ionóforo formador de canal
Forma canal transmembrana o poro
Difunden iones específicos
Mayor velocidad de transporte
Transportador valinomicina
Afinidad por K+
10.000 x
Carbonilos de Valina al centro
Grupos R metilos e isopropilos
hacia afuera
Formador de canal. Gramicidina A
Péptido 15 aa hidrofóbicos
Dimeriza →Forma canal transmembrana
Facilita paso de K+ y Na+
Porinas
• Estructuras β- barril con canal central acuoso
• Tamaño del canal y residuos que lo conforman: Tipo de sustancia
que lo atraviesa
• Modelo tuerca tornillo: paso de compuesto
•Ej: Maltoporina → difusión de maltodextrinas
Canales iónicos
• Presentes en todas las células
• Permiten paso rápido y específico de iones (Na +
, K+
, Cl -
).
• Esenciales para:
Mantenimiento equilibrio osmótico
Transducción de señales
Neurotransmisión (cambios en el potencial de membrana)
Canales de K+
• Proteínas que difunden K+
pasivamente: Citoplasma → medio extracelular
• Secuencias similares en un mismo organismo
• Altamente selectivos
Canal de K+
KcsA (Streptomyces lividans)
Homo tetrámero 158 a.a
Adopta estructura de “embudo”
Lado ancho superior: exterior→ Filtro de selectividad
Revestido por O de carbilos
Altamente conservado (secuencias TVGYG)
Mutaciones: alteran capacidad para discriminar K+
de Na +
Estructura estrecha: poro central: lado citoplasmático,
hidrofóbica → mínima interacción con iones
Hélices interna: parte del poro
Hélices externa: contacto con membrana
Dominio que sobresale: torreta lado extracelular
Canal de K+
¿Cómo discrimina el canal de K+
?
Filtro de selectividad específicamente diseñado
• 8 mol agua polarizables se unen al K+
(prisma de base cuadrangular)
• Filtro se estrecha (3Å): fuerzan al K+
→ dejar agua hidratación
• Espacio con dimensiones adecuadas para K+
y no Na+
(pequeño)
• Rigidéz proteica en región del poro
Filtro de selectividad:
Energía Na+
(-H2O) > Energía Na+
(+H2O)
Alta selectividad
• Repulsiones electrostáticas entre iones K+
Equilibran atracción entre K+ y filtro selectividad
↓
Facilitan tránsito rápido
Canal iónico opera mediante compuertas
Función fisiológica del
canal iónico depende de:
• Especificidad iónica
• Velocidad de transporte
• Capacidad de abrir y cerrar selectivamente
Cerrados, normalmente
Se abren en forma transitoria → tarea/función celular
Regulación mediante compuertas
Apertura y cierre de canales
↓
Respuesta a diversos estímulos
Mecanosensitivos
Deformaciones locales de bicapa
Estímulos físicos directos
(tacto, sonido, presión osmótica)
Regulados por señales
Unión intracelular de molécula señal (Ca++
)
Regulados por ligandos
Estímulos químicos extracelular
Regulados por voltaje
Cambio de potencial de membrana
Regulación por voltaje de canales K+
(Kv)
Cada subunidad de Kv
Dominio citoplasmático
N-terminal
Dominio transmembrana
6 hélices
(S1-S6); S3: S3a y S3b
Dominio T1
Dominio citoplasmático
C-terminal
Entre S5- S6
Lop P (estructura poro tetramérica)
5 cadenas laterales
con carga +
Sensor de voltaje
Esfera de inactivación
Experimentos con compuesto fluorescente
Regulación por voltaje de canales K+
(Kv)
↑ Potencial de membrana → Interior menos negativo → 7 a.a del extermo N-terminal
↓
Se desplazan: desde membrana al entorno
↓
Desplaza extermos citoplasmáticos de S6
(portal)
↓
Desencadena apertura del canal
S3b y S4 forman ensamble en forma de “paleta “(conexión flexible) en la
periferia de la proteína → se extiende al interior de la bicapa
Regulación por voltaje de canales K+
(Kv)
↑Potencial de membrana→ 4 paletas → canal Kv → desplazan → hacia exterior
celular
↓
induce cambio
conformacional
↓
Apertura del poro
↓
S4 permanece
en contacto con
dominio del poro
Difracción de rayos X
Canales iónicos tienen dos compuertas
Apertura del canal → cierre espontáneamente (2 mseg)→ No vuelven a abrirse
hasta la recuperación
del potencial
Kv
2 compuertas :
1.- Para abrir el canal: ↑Potencial de membrana
2.- Cerrarlo poco después
Extracción proteolítica del segmento N-terminal (20 a.a en forma de esfera)
Regulación por voltaje de canales K+
(Kv)
Inhibe el cierre del canal
Esfera gira y se une a la boca del poro
abierto → bloquea paso del iones K+
Modelo de esfera y cadena
Modelo de esfera y cadena
•Péptido de la esfera debe desplegarse para introducirse al poro (serpiente).
•Primeros 10 aa del péptido: hidrófobos, en contacto con residuos hidrófobos
que revisten el poro.
•Diez residuos siguientes: Hidrófilos (varios grupos básicos)→ unen grupos ácidos
cerca de entrada del
poro
•Cualquiera de los 4 péptidos de inactivación pueden bloquear el canal
Otros canales catiónicos
Característica Canal K+
Canales Na++ y
Ca++
Estructura Homotetrámero Monómero (4 dominios)
Regulación Por voltaje Por voltaje
Dominio T1 Presente Ausente
Selectividad iónica K+
Na++
/Ca++
Canales de cloro
• Flia de canales (procariotas y eucariotas)
• Diferente a canales catiónicos
• Desplazamiento transmembrana iones Cl-
a lo largo del gradiente de
concentración
[Cl-
]Extacel= 120 mM
[Cl-]intracel= 4 mM
• Homodímeros→ cada subunidad (18 hélices transmembrana inclinadas) forma
poro selectivo de aniones
• Forma: reloj arena
Parte angosta en centro de membrana
flanqueada por vestíbulos acuosos mas anchos
• Cadena lateral Glu conservada
Se proyecta al interior del poro → repele otros aniones→ cambio
conformacional →cadena lateral se desplaza a un lado
• Especificidad: campo electrostático entre a.a básicos (superficie embudo) y filtro de
selectividad
Acuaporinas
Abundancia de agua en sistemas biológicos
Pequeño tamaño de molécula de H2O
Suponía
Paso rápido de agua a través de membranas
(Difusión simple)
Acuaporinas
Células
↑Velocidad de transporte de agua
↓
Inhibidas reversiblemente por iones Hg++
Existencia de poros (proteína) en la membrana que conducen agua:
ACUAPORINAS
• Amplia distribución en la naturaleza
• Permiten paso de agua (no de solutos) a alta velocidad: 3 x 109
x seg
• Mamíferos: expresan en alto nivel 7 acuaporinas en tejidos transportadores de
agua (renal, salival, lacrimal)
Acuaporinas
Acuaporinas
AQP1 Mejor caracterizada
• Glicoproteína homotetramérica
• 8 α-hélices transmembrana
•Dispuestas formando poro: forma de reloj de arena
• Poro: revestido por grupos hidrófobos: facilita paso de agua
• La constricción :
Cadenas laterales Arg e His (conservados)→ enlaces de H con
agua en tránsito→Liberación de agua de hidratación asociada
Proteínas de transporte
Proteínas de membrana
Canales: Vía de paso física para moléculas pequeñas
Conexinas: uniones en hendidura comunicantes entre
células (iones, aa, mol. Pequeñas)
Diámetro: varia según [ Ca++
]
[Ca++
] < 10 -7
: canal abierto
↑ [ Ca++
] : canal se estrecha
[Ca++
] >5 x 10 -5
M: canal cerrado
Célula mantiene Ca++
: Bombeo exterior
Transporte mitocondrial
Transporte en RE
Ej. Contracción sincronizada
en músculo esquelético
Otras proteínas de transporte
No ofrecen poro discreto que atraviese bicapa
Experimentan cambio conformacional (2 conformaciones alternan)
Desplazan sustancias de un lado a otro de la membrana
Ej: GLUT 1 Transporta glucosa (según concentraciones extra e intracelular)
Tipos de transporte
Monotransporte
Cotransporte
unidireccional
Cotransporte
bidireccional
Resumen transporte pasivo
Transportadores: Porinas, Canales iónicos, Proteínas transportadoras
Facilitan desplazamiento transmembrana de sustancias según sus
concentraciones relativas a ambos lados de la membrana
Transporte activo
• Transporte de sustancias de un lado a otro de la membrana en contra de gradiente
•Proceso endergónico
•Mayoría de los casos: acoplada a hidrólisis de ATP
•ATPasas ligadas a membranas: transportan cationes mediante transporte activo
•Transporte activo secundario: Impulsado por energía libre de gradiente iónico
•Generado por otro mecanismo
Na+
-K+
-ATPasa ( Bomba Na+
-K+
)
• Sistema de transporte activo en la membrana plasmática
• Proteína de membrana (tetrámero),2 Tipos de subunidades:
α2 No glicosiladas
Actividad catalítica
Sitios fijadores de iones
β2 Glicoproteína
Función desconocida (plegamiento)
1 hélice transmembrana
1 dominio extracelular
• Bombea 3 iones Na++
al exterior por cada 2 K+
al interior
• Hidrólisis simultánea de ATP intracelular
•Tipo de cotransporte bidireccional: genera separación de cargas a través
de la membrana
•Control de sodio intracelular: evita entrada exacerbada de agua por osmosis
•Responsable de excitabilidad nerviosa
Na+
-K+
-ATPasa ( Bomba Na+
-K+
)
ATP fosforila proteína en un residuo específico de Asp
Sólo en presencia de Na++
Proteína fosforilada sólo se hidroliza en presencia de K+
Na+
-K+
-ATPasa ( Bomba Na+
-K+
)
Mecanismo de la sodio-Potasio ATPasa
Dos estados de conformación: E1 y E2
Estado E1 fija 3 iones Na+
Une ATP
Complejo E1-ATP-3 Na+
Hidrólisis ATP
Aspartil-P alta energía
E1~Asp P-3 Na+
Libera 3 Na+
al exterior
Conformación de baja energía
Estado E2 fija 2 iones K+
Complejo E2-Asp-2 K+
Hidrólisis P
Complejo E2-2 K+
Cambio de conformación
E2-E1
Libera 2 K+
al interior
Reemplaza por
3 Na+
Calcio ATPasa
Ca+2
→ segundo mensajero: Contracción muscular
Liberación de neurotransmisores
Degradación del glucógeno
Activador del metabolismo oxidativo
Gradiente de calcioCitosol (0,1µM)
Extracelular (1500µM )
Mantenido por Ca++
ATPasa ( 2 conformaciones)
Transporte activo:Membrana plasmática y RE
Bombea 2 iones Ca++
al citosol
Hidrólisis de ATP
Cotransporte 2 o 3 protones
Transporte activo impulsado por gradiente iónico
Energía de los gradientes electroquímicos
generados por Na+
- K+
ATPasa u otros
↓
Reservado para impulsar otros procesos fisiológicos
(transporte activo secundario)
Transporte activo impulsado por gradiente iónico
Ej: Duodeno capta glucosa → cotransporte unidireccional
(dieta) dependiente de Na+
Energía: Gradiente de Na+
Transporte activo de glucosa
Transporte activo impulsado por gradiente iónico
Transporte activo impulsado por gradiente iónico
Ej: Permeasa de lactosa → Sistema de transporte para concentrar
azucares
↓
Energía del gradiente de protones del
metabolismo oxidativo
Cotransporte de H+
y lactosa
Dos estados principales de conformación
E1: Sitio de baja afinidad fijación de lactosa (interior celular)
E2: Sitio de alta afinidad de fijación de lactosa ( exterior celular)
Presenta sitio de fijación de H+
cercano sitio de lactosa
Residuos Arg, His, Glu→ cerca del sitio de fijación H+:
participan en translocación
Interconersión E1↔E2 sólo cuando sitios de fijación H+
y lactosa están llenos o vacíos

Transporte a través de membranas

  • 1.
    Transporte a travésde membranas Dra Evelin Rojas
  • 2.
    Membranas Funcione s Separar célula del medioexterno Compartamentalización Barrera para el paso para sustancias iónicas y polares Iones , piruvato Aminoácidos, H2O u otros Sistemas de transporte Proteínas transportadoras específicas
  • 3.
    Transporte a travésde membranas Cantidad de sustancia transportada Membrana Medio interno Medio externo Concentración de la sustancia a ambos lados de la membrana Potencial de membrana Diferencia de potencial químico Diferencia de potencial eléctrico
  • 4.
    Transporte a travésde membranas Característica No Mediado Mediado Mecanismo Difusión simple Proteínas transportadoras específicas Fuerza impulsora Gradiente de potencial químico Gradiente de concentración a través de membrana Transporte del compuesto Naturaleza química (No polares) Ej. Esteroide, O2 Magnitud del gradiente Solubilidad en el núcleo no polar
  • 5.
    Transporte mediado Transporte mediadopasivo (difusión facilitada) ↑ [ ] ↓ [ ] Transporte activo ↑ [ ]↓ [ ] • A favor del gradiente (favorable) • En contra del gradiente (no favorable) • Acopla a proceso exergónico → Favorece
  • 6.
    Transporte mediado pasivo Proteínastransportadoras Permeasas Canales • Estructura • Mecanismos • Selectividad Diferentes
  • 7.
    Transporte mediado pasivo.Ionóforos • Generalmente de origen bacteriano • Aumentan permeabilidad de la membrana a iones • Difusión pasiva en cualquier dirección • Dos tipos principales: • Transportadores Ión seleccionado →une a él → difunde→ libera ión al otro lado de la membrana • Ionóforo formador de canal Forma canal transmembrana o poro Difunden iones específicos Mayor velocidad de transporte
  • 8.
    Transportador valinomicina Afinidad porK+ 10.000 x Carbonilos de Valina al centro Grupos R metilos e isopropilos hacia afuera
  • 9.
    Formador de canal.Gramicidina A Péptido 15 aa hidrofóbicos Dimeriza →Forma canal transmembrana Facilita paso de K+ y Na+
  • 10.
    Porinas • Estructuras β-barril con canal central acuoso • Tamaño del canal y residuos que lo conforman: Tipo de sustancia que lo atraviesa • Modelo tuerca tornillo: paso de compuesto •Ej: Maltoporina → difusión de maltodextrinas
  • 11.
    Canales iónicos • Presentesen todas las células • Permiten paso rápido y específico de iones (Na + , K+ , Cl - ). • Esenciales para: Mantenimiento equilibrio osmótico Transducción de señales Neurotransmisión (cambios en el potencial de membrana)
  • 12.
    Canales de K+ •Proteínas que difunden K+ pasivamente: Citoplasma → medio extracelular • Secuencias similares en un mismo organismo • Altamente selectivos
  • 13.
    Canal de K+ KcsA(Streptomyces lividans) Homo tetrámero 158 a.a Adopta estructura de “embudo” Lado ancho superior: exterior→ Filtro de selectividad Revestido por O de carbilos Altamente conservado (secuencias TVGYG) Mutaciones: alteran capacidad para discriminar K+ de Na + Estructura estrecha: poro central: lado citoplasmático, hidrofóbica → mínima interacción con iones Hélices interna: parte del poro Hélices externa: contacto con membrana Dominio que sobresale: torreta lado extracelular
  • 14.
    Canal de K+ ¿Cómodiscrimina el canal de K+ ? Filtro de selectividad específicamente diseñado • 8 mol agua polarizables se unen al K+ (prisma de base cuadrangular) • Filtro se estrecha (3Å): fuerzan al K+ → dejar agua hidratación • Espacio con dimensiones adecuadas para K+ y no Na+ (pequeño) • Rigidéz proteica en región del poro Filtro de selectividad: Energía Na+ (-H2O) > Energía Na+ (+H2O) Alta selectividad • Repulsiones electrostáticas entre iones K+ Equilibran atracción entre K+ y filtro selectividad ↓ Facilitan tránsito rápido
  • 15.
    Canal iónico operamediante compuertas Función fisiológica del canal iónico depende de: • Especificidad iónica • Velocidad de transporte • Capacidad de abrir y cerrar selectivamente Cerrados, normalmente Se abren en forma transitoria → tarea/función celular
  • 16.
    Regulación mediante compuertas Aperturay cierre de canales ↓ Respuesta a diversos estímulos Mecanosensitivos Deformaciones locales de bicapa Estímulos físicos directos (tacto, sonido, presión osmótica) Regulados por señales Unión intracelular de molécula señal (Ca++ ) Regulados por ligandos Estímulos químicos extracelular Regulados por voltaje Cambio de potencial de membrana
  • 17.
    Regulación por voltajede canales K+ (Kv) Cada subunidad de Kv Dominio citoplasmático N-terminal Dominio transmembrana 6 hélices (S1-S6); S3: S3a y S3b Dominio T1 Dominio citoplasmático C-terminal Entre S5- S6 Lop P (estructura poro tetramérica) 5 cadenas laterales con carga + Sensor de voltaje Esfera de inactivación
  • 18.
    Experimentos con compuestofluorescente Regulación por voltaje de canales K+ (Kv) ↑ Potencial de membrana → Interior menos negativo → 7 a.a del extermo N-terminal ↓ Se desplazan: desde membrana al entorno ↓ Desplaza extermos citoplasmáticos de S6 (portal) ↓ Desencadena apertura del canal
  • 19.
    S3b y S4forman ensamble en forma de “paleta “(conexión flexible) en la periferia de la proteína → se extiende al interior de la bicapa Regulación por voltaje de canales K+ (Kv) ↑Potencial de membrana→ 4 paletas → canal Kv → desplazan → hacia exterior celular ↓ induce cambio conformacional ↓ Apertura del poro ↓ S4 permanece en contacto con dominio del poro Difracción de rayos X
  • 20.
    Canales iónicos tienendos compuertas Apertura del canal → cierre espontáneamente (2 mseg)→ No vuelven a abrirse hasta la recuperación del potencial Kv 2 compuertas : 1.- Para abrir el canal: ↑Potencial de membrana 2.- Cerrarlo poco después
  • 21.
    Extracción proteolítica delsegmento N-terminal (20 a.a en forma de esfera) Regulación por voltaje de canales K+ (Kv) Inhibe el cierre del canal Esfera gira y se une a la boca del poro abierto → bloquea paso del iones K+ Modelo de esfera y cadena
  • 22.
    Modelo de esferay cadena •Péptido de la esfera debe desplegarse para introducirse al poro (serpiente). •Primeros 10 aa del péptido: hidrófobos, en contacto con residuos hidrófobos que revisten el poro. •Diez residuos siguientes: Hidrófilos (varios grupos básicos)→ unen grupos ácidos cerca de entrada del poro •Cualquiera de los 4 péptidos de inactivación pueden bloquear el canal
  • 23.
    Otros canales catiónicos CaracterísticaCanal K+ Canales Na++ y Ca++ Estructura Homotetrámero Monómero (4 dominios) Regulación Por voltaje Por voltaje Dominio T1 Presente Ausente Selectividad iónica K+ Na++ /Ca++
  • 24.
    Canales de cloro •Flia de canales (procariotas y eucariotas) • Diferente a canales catiónicos • Desplazamiento transmembrana iones Cl- a lo largo del gradiente de concentración [Cl- ]Extacel= 120 mM [Cl-]intracel= 4 mM • Homodímeros→ cada subunidad (18 hélices transmembrana inclinadas) forma poro selectivo de aniones • Forma: reloj arena Parte angosta en centro de membrana flanqueada por vestíbulos acuosos mas anchos • Cadena lateral Glu conservada Se proyecta al interior del poro → repele otros aniones→ cambio conformacional →cadena lateral se desplaza a un lado • Especificidad: campo electrostático entre a.a básicos (superficie embudo) y filtro de selectividad
  • 25.
    Acuaporinas Abundancia de aguaen sistemas biológicos Pequeño tamaño de molécula de H2O Suponía Paso rápido de agua a través de membranas (Difusión simple)
  • 26.
    Acuaporinas Células ↑Velocidad de transportede agua ↓ Inhibidas reversiblemente por iones Hg++ Existencia de poros (proteína) en la membrana que conducen agua: ACUAPORINAS • Amplia distribución en la naturaleza • Permiten paso de agua (no de solutos) a alta velocidad: 3 x 109 x seg • Mamíferos: expresan en alto nivel 7 acuaporinas en tejidos transportadores de agua (renal, salival, lacrimal)
  • 27.
  • 28.
    Acuaporinas AQP1 Mejor caracterizada •Glicoproteína homotetramérica • 8 α-hélices transmembrana •Dispuestas formando poro: forma de reloj de arena • Poro: revestido por grupos hidrófobos: facilita paso de agua • La constricción : Cadenas laterales Arg e His (conservados)→ enlaces de H con agua en tránsito→Liberación de agua de hidratación asociada
  • 29.
    Proteínas de transporte Proteínasde membrana Canales: Vía de paso física para moléculas pequeñas Conexinas: uniones en hendidura comunicantes entre células (iones, aa, mol. Pequeñas) Diámetro: varia según [ Ca++ ] [Ca++ ] < 10 -7 : canal abierto ↑ [ Ca++ ] : canal se estrecha [Ca++ ] >5 x 10 -5 M: canal cerrado Célula mantiene Ca++ : Bombeo exterior Transporte mitocondrial Transporte en RE Ej. Contracción sincronizada en músculo esquelético
  • 30.
    Otras proteínas detransporte No ofrecen poro discreto que atraviese bicapa Experimentan cambio conformacional (2 conformaciones alternan) Desplazan sustancias de un lado a otro de la membrana Ej: GLUT 1 Transporta glucosa (según concentraciones extra e intracelular)
  • 31.
  • 32.
    Resumen transporte pasivo Transportadores:Porinas, Canales iónicos, Proteínas transportadoras Facilitan desplazamiento transmembrana de sustancias según sus concentraciones relativas a ambos lados de la membrana
  • 33.
    Transporte activo • Transportede sustancias de un lado a otro de la membrana en contra de gradiente •Proceso endergónico •Mayoría de los casos: acoplada a hidrólisis de ATP •ATPasas ligadas a membranas: transportan cationes mediante transporte activo •Transporte activo secundario: Impulsado por energía libre de gradiente iónico •Generado por otro mecanismo
  • 34.
    Na+ -K+ -ATPasa ( BombaNa+ -K+ ) • Sistema de transporte activo en la membrana plasmática • Proteína de membrana (tetrámero),2 Tipos de subunidades: α2 No glicosiladas Actividad catalítica Sitios fijadores de iones β2 Glicoproteína Función desconocida (plegamiento) 1 hélice transmembrana 1 dominio extracelular • Bombea 3 iones Na++ al exterior por cada 2 K+ al interior • Hidrólisis simultánea de ATP intracelular •Tipo de cotransporte bidireccional: genera separación de cargas a través de la membrana •Control de sodio intracelular: evita entrada exacerbada de agua por osmosis •Responsable de excitabilidad nerviosa
  • 35.
  • 36.
    ATP fosforila proteínaen un residuo específico de Asp Sólo en presencia de Na++ Proteína fosforilada sólo se hidroliza en presencia de K+ Na+ -K+ -ATPasa ( Bomba Na+ -K+ )
  • 37.
    Mecanismo de lasodio-Potasio ATPasa Dos estados de conformación: E1 y E2 Estado E1 fija 3 iones Na+ Une ATP Complejo E1-ATP-3 Na+ Hidrólisis ATP Aspartil-P alta energía E1~Asp P-3 Na+ Libera 3 Na+ al exterior Conformación de baja energía Estado E2 fija 2 iones K+ Complejo E2-Asp-2 K+ Hidrólisis P Complejo E2-2 K+ Cambio de conformación E2-E1 Libera 2 K+ al interior Reemplaza por 3 Na+
  • 38.
    Calcio ATPasa Ca+2 → segundomensajero: Contracción muscular Liberación de neurotransmisores Degradación del glucógeno Activador del metabolismo oxidativo Gradiente de calcioCitosol (0,1µM) Extracelular (1500µM ) Mantenido por Ca++ ATPasa ( 2 conformaciones) Transporte activo:Membrana plasmática y RE Bombea 2 iones Ca++ al citosol Hidrólisis de ATP Cotransporte 2 o 3 protones
  • 39.
    Transporte activo impulsadopor gradiente iónico Energía de los gradientes electroquímicos generados por Na+ - K+ ATPasa u otros ↓ Reservado para impulsar otros procesos fisiológicos (transporte activo secundario)
  • 40.
    Transporte activo impulsadopor gradiente iónico Ej: Duodeno capta glucosa → cotransporte unidireccional (dieta) dependiente de Na+ Energía: Gradiente de Na+
  • 41.
  • 42.
    Transporte activo impulsadopor gradiente iónico
  • 43.
    Transporte activo impulsadopor gradiente iónico Ej: Permeasa de lactosa → Sistema de transporte para concentrar azucares ↓ Energía del gradiente de protones del metabolismo oxidativo Cotransporte de H+ y lactosa Dos estados principales de conformación E1: Sitio de baja afinidad fijación de lactosa (interior celular) E2: Sitio de alta afinidad de fijación de lactosa ( exterior celular) Presenta sitio de fijación de H+ cercano sitio de lactosa Residuos Arg, His, Glu→ cerca del sitio de fijación H+: participan en translocación Interconersión E1↔E2 sólo cuando sitios de fijación H+ y lactosa están llenos o vacíos